Question

【題目】某化工廠的污水池中；含有一種有害的、難以降解的有機化合物A。研究人員用化合物A、磷酸鹽以及微量元素配制的培養基，成功地篩選到能高效降解化合物A的細菌(目的菌)。實驗的主要步驟如下圖所示，請分析回答問題：

（1）加入化合物A的培養基屬于__________培養基，目的菌生長所需的氮源和碳源是來自培養基中的______________________________。

（2）轉為固體培養時，常采用平板劃線的方法接種，獲得單菌落后繼續篩選，在每次劃線之前都要灼燒接種環，目的是__________________________________________________。

（3）某同學計劃統計污水池中目的菌的總數，他選用104、105、106的稀釋液進行平板培養，每種稀釋液都設置了3個培養皿。從設計實驗的角度看還應該設置哪些對照實驗在相同條件下同時培養？_______________________________________________________________________________________。

（4）在農業生產研究中，常需要進行微生物的培養和計數。下圖是利用平板劃線法進行微生物接種，把聚集的菌種逐步稀釋分散到培養基的表面，為達到這一目的，操作上應注意。

①____________________________________________________________________。

②____________________________________________________________________。

③_____________________________________________________________________。

Answer 1

【答案】選擇 化合物A 殺死上次劃線結束后接種環上殘留的菌種 不接種的空白培養基，證明培養基制備是否合格(是否被雜菌污染) 每次劃線前要灼燒接種環 冷卻后從上一區劃線末端開始劃 首尾區不重疊

【解析】

根據題意分析可知：該實驗的目的是篩選出高效降解化合物A的細菌，在以化合物A為唯一碳源的培養基中只有能降解化合物A的微生物才能以化合物A為碳源和氮源生長繁殖，不能利用化合物A的微生物因缺乏碳源和氮源，無法生長繁殖；分解化合物A的微生物是需氧微生物，因此在培養過程中應該震蕩培養，增加培養液中的溶氧量滿足微生物對氧氣的需求。實驗結束時應該將使用過的培養基應該進行滅菌處理才能倒掉，防止污染環境。

（1）據分析知，加入化合物A的培養基屬于選擇培養基，目的菌生長所需的氮源和碳源都是來自培養基中的化合物A。

（2）平板劃線法接種，是通過劃線逐步稀釋，最后獲得單菌落的方法，所以在每次劃線之前都要灼燒接種環，以便殺死上次劃線結束后接種環上殘留的菌種。

（3）為了證明培養基制備是合格的，沒有被雜菌污，還應該設置不接種的空白培養基作為對照。

（4）想要把聚集的菌種逐步稀釋分散到培養基的表面，操作上應注意：①每次劃線前要灼燒接種環以便殺死接種環上殘留的細菌；②上一區域末端菌體數最少，所以冷卻后從上一區劃線末端開始劃；③尾區已經充分稀釋，所以不能與首區重疊。