Question

【題目】我國科學(xué)家屠呦呦及其團(tuán)隊(duì)從青蒿中分離出青蒿素用于瘧疾的治療，這一措施至今挽救了全球數(shù)百萬人的生命．青蒿中青蒿素的含量很低，科研工作者一直致力于提高青蒿素含量的研究．某研究小組給青蒿轉(zhuǎn)入青蒿素合成的關(guān)鍵基因fps，通過該基因的過量表達(dá)來提高青蒿素的產(chǎn)量．請回答相關(guān)問題．
（1）提取青蒿的總RNA，在酶作用下獲得青蒿的cDNA．
（2）根據(jù)基因fps的編碼序列設(shè)計(jì) ， 通過得到目的基因，然后構(gòu)建含有fps基因的表達(dá)載體．為了便于篩選，表達(dá)載體中應(yīng)含有 ．
（3）將表達(dá)載體導(dǎo)入農(nóng)桿菌細(xì)胞中，用此農(nóng)桿菌侵染無菌青蒿苗葉片，培養(yǎng)侵染后的葉片獲得幼苗．培養(yǎng)過程中細(xì)胞發(fā)生的主要變化是和 ．
（4）將獲得的22株生長健壯的轉(zhuǎn)基因青蒿苗移栽到大田里，待其生長到現(xiàn)蕾期后收獲植株地上部分，測定青蒿素的含量，得到的結(jié)果如圖所示：
測定結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)基因青蒿植株中青蒿素含量最多約是對照組的倍．不同植株中青蒿素的含量 ， 這可能是由于T﹣DNA整合到青蒿基因組的不同位置，使外源基因的引起的．

Answer 1

【答案】
（1）逆轉(zhuǎn)錄
（2）特定的引物對；PCR；標(biāo)記基因
（3）細(xì)胞分裂；細(xì)胞分化
（4）2；有很大差異；表達(dá)效率不同
【解析】解：（1）以RNA為模板合成DNA的過程為逆轉(zhuǎn)錄過程，該過程需要逆轉(zhuǎn)錄酶的催化．（2）根據(jù)基因fps的編碼序列設(shè)計(jì)引物，通過PCR擴(kuò)增技術(shù)得到目的基因，然后構(gòu)建含有fps基因的表達(dá)載體．基因表達(dá)載體上必須要有標(biāo)記基因，作用是鑒定和篩選含有目的基因的受體細(xì)胞．（3）離體葉片獲得幼苗，必須通過植物的組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)成再生植株，該過程需要要經(jīng)過脫分化和再分化，即培養(yǎng)過程中細(xì)胞發(fā)生的主要變化是細(xì)胞分裂和細(xì)胞分化．（4）據(jù)圖分析，對照組青蒿素含量為5mg/千克，第22株轉(zhuǎn)基因青蒿苗中青蒿素含量最多，為10mg/千克左右，大約是對照組的2倍．由圖可知，不同植株中青蒿素的含量不同，這可能是由于T﹣DNA整合到青蒿基因組的不同位置，使外源基因的選擇性表達(dá)的結(jié)果引起的． 所以答案是：（1）逆轉(zhuǎn)錄（2）特定的引物對 PCR 標(biāo)記基因（3）細(xì)胞分裂 細(xì)胞分化（4）2 有很大差異 表達(dá)效率不同
【考點(diǎn)精析】解答此題的關(guān)鍵在于理解基因工程的原理及技術(shù)的相關(guān)知識(shí)，掌握基因工程的原理是利用DNA重組技術(shù)．