Question

【題目】利用PCR技術擴增目的基因，其原理與細胞內DNA復制類似（如下圖所示）。圖中引物為單鏈DNA片段，它是子鏈合成延伸的基礎。下列敘述錯誤的是（ ）

A.第四輪循環(huán)產物中PCR方法擴增出的目的基因片段只有8個

B.設計引物時需要避免引物之間形成堿基互補配對而造成引物自連

C.退火溫度過高可能導致PCR反應得不到任何擴增產物

D.第四輪循環(huán)產物中同時含有引物A和引物B的DNA片段所占的比率為15/16

Answer 1

【答案】D

【解析】

PCR全稱為多聚酶鏈式反應，是一種體外迅速擴增DNA片段的技術，它能以極少量的DNA為模板，在幾個小時內復制出上百萬份的DNA拷貝。PCR的原理為DNA復制，需要在一定的緩沖液中進行，所需的條件為模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。PCR的反應過程：變性、復性、延伸。PCR產物以指數(shù)的方式擴增，即一個DNA分子經n次擴增，產物總量為2n。

A、根據DNA半保留復制的特點，經過第一、二輪循環(huán)產生的DNA分子兩條鏈長度均不相等，第三輪循環(huán)后產生的DNA中有2個為兩條鏈等長的目的基因片段，則第四輪循環(huán)產物中有8個兩條鏈等長的目的基因片段，A正確；

B、設計引物時，需要避免引物之間形成堿基互補配對而造成引物自連，影響引物與目的基因單鏈的結合，B正確；

C、退火的目的是使兩種引物通過堿基互補配對與兩條DNA單鏈結合，而高溫條件下DNA雙鏈會分開，因此退火溫度過高可能引起兩種引物不能與兩條DNA單鏈結合，進而導致PCR反應得不到任何擴增產物，C正確；

D、DNA復制為半保留復制，第四輪循環(huán)即DNA復制4次，共形成24＝16個DNA分子，其中含有最初模板鏈的2個DNA分子含有引物A或引物B，其余14個DNA分子均含有引物A和引物B，所以第四輪循環(huán)產物中同時含有引物A和引物B的DNA片段所占的比率為14/16＝7/8，D錯誤。

故選D。