Question

【題目】如圖是利用轉基因技術培育抗病小麥的過程。請據圖回答問題：

（1）在步驟⑤⑥中都需用_____________處理。為了確認目的基因通過⑦導入植物細胞后是否轉錄，通常采用_____________法進行檢測；驗證目的基因導入受體細胞后是否成功表達，通常采用__________法從分子水平進行檢測。

（2）重組質粒T除含有目的基因外，還必須有_____________、_____________和_____________等。

（3）圖示中將基因表達載體構建完成后沒有直接導入農桿菌，而是先將其導入大腸桿菌，目的是_______。

（4）假設該抗病基因D，通過基因工程導入小麥后連接到小麥的一條染色體上，則該小表進行減數分裂的細胞在聯會時有_____________個D基因。

Answer 1

【答案】 Ca2+ 分子雜交 抗原-抗體雜交 啟動子 終止子 標記基因 獲取大量重組質粒（讓目的基因擴增） 2

【解析】試題分析：步驟①~⑦分別是逆轉錄、PCR技術、酶切質粒、構建重組質粒、將重組質粒導入大腸桿菌擴增重組質粒、將重組質粒導入農桿菌、利用農桿菌轉化法培育抗病小麥新植株。重組質粒包括啟動子、終止子、標記基因、目的基因。將重組質粒導入原核生物，需先用Ca2+處理使之處于感受態。檢測目的基因是否整合到受體細胞的染色體DNA上，可采用DNA分子雜交法，檢測目的基因是否轉錄出mRNA，可采用核酸分子雜交法，檢測目的基因是否翻譯出蛋白質，可采用抗原-抗體雜交法。

（1）步驟⑤⑥分別是將重組質粒導入大腸桿菌、農桿菌，需用Ca2+處理使之處于感受態，能夠從溶液中吸收重組質粒。檢測目的基因是否轉錄，通常采用分子雜交法，若轉錄，則出現雜交帶；目的基因是否成功表達出相應蛋白質，通常采用抗原-抗體雜交法，若表達成功，則出現雜交帶。（2）重組質粒包括目的基因、啟動子、終止子、標記基因等。（3）在將基因表達載體導入農桿菌前，將目的基因導入大腸桿菌的目的是擴增目的基因，增加目的基因的數量。（4）減數第一次分裂前的間期，DNA復制和有關蛋白質的合成，所以聯會時DNA已完成復制，此時細胞中有2個D基因。