Question

【題目】回答下列有關微生物的問題。

苯酚（C6H5OH）是廣泛存在于化工行業廢水中的一種污染物。為了分離和純化高效分解苯酚的細菌。科研人員進行了下圖所示的相關試驗。（實驗中的LB培養基能使菌種成倍增加）

（1）該實驗需要用到的實驗儀器有：錐形瓶、培養皿、_________________（寫出2種即可，但必須是微生物培養專用）。

（2）理論上，步驟②中的LB培養基含有的營養物質除了碳源外，還有__________等。

A. 氮源 B. 激素 C. 酶 D. 生長因子 E.伊紅美藍

（3）步驟③培養基成分中的苯酚作為細菌培養唯一的____________；步驟③和④中的培養基最主要的成分差異是后者添加了____________。步驟②、③、④的培養基必須經過滅菌，其具體要求是____________。

（4）經步驟④培養后的菌落如圖，則接種時甲、乙、丙三個區域的操作順序是____________。多次劃線后，最終可以得到由一個細胞繁殖而來的____________。

（5）步驟④的目的是____________；經過步驟⑤培養后，應該從殘余苯酚濃度___________的培養瓶中再分離、再培養目的菌株。

Answer 1

【答案】高壓滅菌鍋、超凈工作臺、接種環（針） A、D 碳源 瓊脂 121℃，1.05kg/cm2，15~30分鐘 甲--乙--丙 單個菌落 分離純化 最低

【解析】

從土壤中分離微生物的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養、梯度稀釋、涂布培養和篩選菌株；微生物的營養物質有5類，分別是水、無機鹽、碳源、氮源及特殊生長因子；篩選菌株的過程要使用選擇培養基，操作過程中要注意無菌操作；常用的固體培養基上接種方法主要有平板劃線法和稀釋涂布平板法，微生物計數可用稀釋涂布平板法和血球計數板計數法；滅菌的方法主要有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌。

（1）微生物分離實驗的過程中常用的儀器有錐形瓶、培養皿、高壓滅菌鍋、超凈工作臺、接種環（針）等。

（2）步驟②中的LB培養基中必須添加的微生物的營養物質有5類，分別是水、無機鹽、碳源、氮源及特殊生長因子，故選AD。

（3）該實驗中，苯酚作為細菌培養唯一的碳源；步驟③和④中的培養基分別是液體培養基和固體培養基，因此兩者最主要的成分差異是后者添加了瓊脂；步驟②、③、④的培養基需用高壓蒸汽滅菌，其具體要求是121℃，1.05kg/cm2，15～30分鐘。

（4）利用平板劃線法接種時，隨著劃線次數的增加，細菌數目逐漸減少，因此圖中劃線順序應為甲→乙→丙，最終可以得到由一個細胞繁殖而來的單個菌落。
（5）步驟④的目的是分離純化；經過步驟⑤培養后，應該從殘余苯酚濃度最低的培養瓶中再分離、再培養目的菌株。