Question

【題目】人血清白蛋白(HSA)具有重要的醫(yī)用價值，只能從血漿中制備。下圖是以基因工程技術(shù)獲取重組HSA(rHSA)的兩條途徑。

(1)為獲取HSA基因，首先需采集人的血液，提取________合成總cDNA，然后以cDNA為模板，采用PCR技術(shù)擴增HSA基因。下圖中箭頭表示一條引物結(jié)合模板的位置及擴增方向，請用箭頭在方框內(nèi)標出另一條引物的位置及擴增方向__________。

(2)啟動子通常具有物種及組織特異性，構(gòu)建在水稻胚乳細胞內(nèi)特異表達rHSA的載體，需要選擇的啟動子是________。

A.人血細胞啟動子 B.水稻胚乳細胞啟動子

C.大腸桿菌啟動子 D.農(nóng)桿菌啟動子

(3)利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化水稻受體細胞的過程中，需添加酚類物質(zhì)，其目的是_______________。

(4)人體合成的初始HSA多肽，需要經(jīng)過膜系統(tǒng)加工形成正確的空間結(jié)構(gòu)才能有活性。與途徑Ⅱ相比，選擇途徑Ⅰ獲取rHSA的優(yōu)勢是_____________________。

(5)為證明rHSA具有醫(yī)用價值，須確認__________________________。

Answer 1

【答案】總RNA （或mRNA） B 吸引農(nóng)桿菌移向水稻受體細胞，有利于目的基因成功轉(zhuǎn)化 水稻是真核生物，具有膜系統(tǒng)，能對初始rHSA多肽進行高效加工 rHSA與HSA的生物學功能一致

【解析】

由圖可知，途徑Ⅰ是將人血清白蛋白基因與運載體結(jié)合導入農(nóng)桿菌中，借助農(nóng)桿菌感染水稻受體細胞，將目的基因?qū)�入水稻細胞中，并�?jīng)過植物組織培養(yǎng)獲得轉(zhuǎn)基因水稻，人血清白蛋白基因在水稻的胚乳細胞中表達形成人血清白蛋白。途徑Ⅱ是將人的血清白蛋白基因與運載體結(jié)合后導入大腸桿菌，借助大腸桿菌繁殖速度快的特點，可在大腸桿菌中獲得大量的人血清白蛋白。

（1）為獲取HSA基因，首先需采集人的血液，提取mRNA通過反轉(zhuǎn)錄法合成總cDNA，然后以cDNA為模板，采用PCR技術(shù)擴增HSA基因。由于DNA兩條鏈是反向平行的，復制時也是方向相反的，如圖中箭頭表示一條引物結(jié)合模板的位置及擴增方向，則另一條引物位于另一條鏈的相反一端。如圖所示。

（2）啟動子是RNA聚合酶的結(jié)合位點，能啟動基因的轉(zhuǎn)錄，若構(gòu)建在水稻胚乳細胞內(nèi)特異表達rHSA的載體，需要選擇水稻胚乳細胞啟動子才能使目的基因在胚乳細胞中特異性表達。故B符合題意，ACD不符合題意。

（3）利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化水稻受體細胞的過程中，需添加酚類物質(zhì)，其目的是吸引農(nóng)桿菌移向水稻受體細胞，有利于目的基因成功轉(zhuǎn)化。
（4）由于大腸桿菌為原核生物，無生物膜系統(tǒng)，而水稻為真核生物，具有生物膜系統(tǒng)，故在合成rHAS時，與途徑Ⅱ相比，選擇途徑I獲取rHSA的優(yōu)勢是：水稻是真核生物，具有膜系統(tǒng)，能對初始rHSA多肽進行高效加工。
（5）為證明rHSA具有醫(yī)用價值，需對基因工程的產(chǎn)物進行鑒定，即確認rHSA與HSA的生物學功能一致。