Question

【題目】異煙肼(isoniazid)又名雷米封(rimifon)，是吡哆醇的結(jié)構(gòu)類似物或代謝拮抗物。科研人員為了定向培育抗異煙肼的吡哆醇高產(chǎn)細(xì)菌突變株，采用梯度平板法進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)：

①在滅菌后的培養(yǎng)皿中加入l0mL融化的普通培養(yǎng)基，皿底斜放（一邊墊起），待凝（如圖1）；

②待培養(yǎng)基凝固后將培養(yǎng)皿放平，倒上第二層含適當(dāng)濃度的異煙肼的培養(yǎng)基(l0mL)，這樣便得到異煙肼含量從一邊到另一邊逐漸升高的梯度平板（如圖2）；

③用移液管移取經(jīng)誘變處理后的細(xì)菌細(xì)胞懸液0. 1mL到梯度平板上，進(jìn)行涂布；

④將平板倒置于22℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段時間，可觀察到梯度平板上細(xì)菌的生長情況（如圖3）。

據(jù)分析回答：

(1)從作用來看，本研究使用的培養(yǎng)基屬于_____培養(yǎng)基，為了使其能夠凝固，在配制時通常需要在培養(yǎng)基中加入____。

(2)步驟①中培養(yǎng)基常用的滅菌方法是_____ ，步驟③中三角刮刀常用的滅菌方法是 ___。

(3)步驟③中，滴加到梯度平板上的細(xì)菌細(xì)胞懸液一般不超過0.ImL的原因是____。

(4)根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果推測，圖3抗性菌落主要位于圖2中_____端，其具有抗藥性的來源是____。

Answer 1

【答案】選擇 瓊脂 高壓蒸汽滅菌 灼燒滅菌 培養(yǎng)基表面的細(xì)菌細(xì)胞懸液會出現(xiàn)積液，導(dǎo)致菌體堆積，影響分離效果 B 基因突變

【解析】

1、培養(yǎng)基按功能分：選擇培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基。

2、無菌技術(shù)

（1）關(guān)鍵：防止外來雜菌的入侵。

（2）具體操作

①對實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手進(jìn)行清潔和消毒。

②將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌。

③為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行。

④實(shí)驗(yàn)操作時應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品接觸。

（1）該實(shí)驗(yàn)所用的培養(yǎng)基中含有藥物，只有能抗藥物的微生物才能在該培養(yǎng)基上生存，因此該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基；為了使培養(yǎng)基能夠凝固，通常需要在培養(yǎng)基中加入凝固劑--瓊脂。

（2）培養(yǎng)基常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌，三角刮刀常用的滅菌方法是灼燒滅菌。

（3）滴加到梯度平板上的酵母菌細(xì)胞懸液一般不超過0.1mL的原因是培養(yǎng)基表面的酵母菌細(xì)胞懸液會出現(xiàn)積液，導(dǎo)致菌體堆積，影響分離效果。

（4）根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果推測，圖3抗性菌落主要位于圖2中B端，菌株的抗藥性是經(jīng)誘變處理得到的，其來源是基因突變。