Question

【題目】綿羊雖是第一種體細胞克隆成功的哺乳動物，但該技術體系仍然存在效率低下的問題，體外培養體系對綿羊體外胚胎發育至關重要。已有研究表明，在胚胎培養液中添加維生素C可顯著提高豬體細胞克隆胚胎囊胚率，但不知對綿羊克隆胚胎囊胚率是否有影響，某獸醫研究所對此進行了研究。下圖為實驗過程中獲得重組細胞的大致過程，回答下列問題：

（1）圖示實驗二屬于___________________移植，收集的小尾寒羊卵母細胞應培養到_______________________________（時期）進行去核，去核實際操作是用微型吸管吸出_________________________。

（2）下表分別為實驗一和實驗二在胚胎培養液中加入維生素C后的相關實驗結果：

實驗一：不同濃度維生素C對綿羊孤雌胚胎發育的影響

維生素C濃度/（molL-1）	重復次數	胚胎總數	卵裂率	桑椹胚率（桑椹胚數/卵裂數）	囊胚率（囊胚數/卵裂數）
0	3	120	82.80	26.47	15.73
50	3	141	82.37	28.60	20.92
100	3	99	83.89	21.70	14.34
200	3	80	85.56	22.61	12.29

實驗二：維生素C對綿羊體細胞克隆胚胎發育的影響

維生素C濃度/（molL-1）	重復次數	胚胎總數	卵裂率	桑椹胚率（桑椹胚數/卵裂數）	囊胚率（囊胚數/卵裂數）
x	3	70	83.93	28.89	14.96
0	3	76	87.05	22.53	9.47

①題圖中“孤雌激活處理”的實質是_________________________，進而能發育成早期胚胎，以便進行實驗一。

②據表中數據可知，進行實驗一可以為實驗二提供_________________________，實驗二中“x”處數據應為_________________________。

③綜合實驗一和實驗二結果可說明_________________________。

Answer 1

【答案】體細胞核 減數第二次分裂中期（或M II中期） 細胞核和第一極體 激活卵母細胞使其增殖分化 所需的較適宜的維生素C濃度 50 在胚胎培養液中添加50μmol·L-1維生素C可顯著提高綿羊孤雌胚胎發育和體細胞克隆胚胎囊胚率

【解析】

題圖：涉及體細胞核移植、早期胚胎培養和孤雌生殖；

實驗一、二：自變量為維生素C濃度，因變量為囊胚率（囊胚數/卵裂數）、卵裂率、桑椹胚率（桑椹胚數/卵裂數）。

（1）據圖可知，實驗二屬于體細胞核移植，收集的小尾寒羊卵母細胞到減二中期時為最適合接受核移植的，此時第一極體與卵母細胞緊密接觸，故在使用微型吸管吸取卵母細胞核的同時會將第一極體吸出。

（2）①題圖中“孤雌激活處理”是為了使次級卵母細胞單獨發育為胚胎，故其實質為激活卵母細胞使其增殖分化；②據表中數據可知，實驗一相當于實驗二的預實驗，可為實驗二提供胚胎發育較適宜的維生素C濃度；“x”濃度下桑葚胚率和囊胚率都顯著高于濃度為0時，結合前文推知“x”為50。③綜合比較實驗一和實驗二各濃度下的數據，在胚胎培養液中添加50μmol·L-1維生素C可顯著提高綿羊孤雌胚胎發育和體細胞克隆胚胎囊胚率。