Question

【題目】奶牛養殖業中乳腺炎和口蹄疫分別是由細菌和病毒引起的兩種嚴重疾病。研究者利用生物技術培育出轉乳鐵蛋白肽（抗細菌）和人干擾素（抗病毒）的雙轉基因奶牛新品種。下圖1為基因表達載體，圖2為培育流程。

（1）構建基因表達載體時要用到的工具酶是_______________________。圖1中新青霉素抗性基因的作用是_______________________。

（2）研究者利用含有乳鐵蛋白肽基因和人干擾素基因的DNA片段分別制成探針，與乳腺細胞、口腔上皮細胞、蹄部細胞等提取的RNA進行雜交:結果如下表：

探針 結果	乳腺細胞	口腔上皮細胞	蹄部細胞
乳鐵蛋白肽基因探針	出現雜交帶	未現雜交帶	未現雜交帶
人干擾素基因探針	出現雜交帶	出現雜交帶	出現雜交帶

說明:牛乳鐵蛋白肽基因只能在轉基因奶牛的______________細胞中表達，人干擾素基因則可在轉基因奶牛的___________細胞中表達，這與構建表達載體時___________的選擇有關。

（3）圖2中④是處于_______________（時期）的卵母細胞，而③一般選傳代10代以內的細胞，理由是：___________________________________________________________________________。

（4）不需要對重組胚胎性別進行鑒定，理由是：____________________________________________。

Answer 1

【答案】 限制酶和DNA連接酶 鑒別、篩選出含有目的基因的細胞（或胚胎） 乳腺（細胞） 全身（細胞）/多種體細胞 啟動子 減數第二次分裂中期（或MⅡ中期） 以保持細胞正常的二倍體核型或遺傳物質未發生改變或細胞沒有發生突變 牛胎兒成纖維細胞來自雄性個體，胚胎就是雄性，來自雌性個體，胚胎就是雌性

【解析】試題分析：據圖分析，圖1為基因表達載體，含有復制原點、啟動子、終止子、目的基因（牛乳鐵蛋白肽基因和人干擾素基因）、標記基因。圖2 轉基因奶牛的培育過程，該過程利用了動物細胞培養技術、轉基因技術、核移植技術、胚胎移植技術等。

（1）基因工程過程中，構建基因表達載體時，利用的工具酶是限制酶和DNA連接酶；圖1中新霉素抗性基因是標記基因，由于鑒別、篩選出含有目的基因的細胞（或胚胎）。

（2）根據表格分析，牛乳鐵蛋白肽基因探針只在乳腺細胞出現了雜交帶，說明該基因只能在轉基因奶牛的乳腺細胞中表達；人干擾素基因探針在三種細胞都出現了雜交帶，說明該基因可以在轉基因奶牛的全身所有細胞中表達，這與構建表達載體時啟動子的選擇有關。

（3）據圖分析，圖2中④是核移植的受體細胞，一般是處于減數第二次分裂中期（或MⅡ中期）的卵母細胞；③是目的基因的受體細胞，一般選傳代10代以內的細胞，以保持細胞正常的二倍體核型或遺傳物質為發生改變或細胞沒有發生突變。

（4）牛胎兒成纖維細胞來自雄性個體，胚胎就是雄性，來自雌性個體，胚胎就是雌性，因此不需要對重組胚胎性別進行鑒定。