Question

【題目】研究人員用四倍體馬鈴薯（4n=48）和抗青枯病的野生型二倍體馬鈴薯（2n=24）進行體細胞雜交，培育抗青枯病的馬鈴薯。

（1）研究人員用四倍體馬鈴薯的葉片探究原生質體制備條件，結果如下表所示。

①據表分析，制備原生質體的最佳組合是第_____組，葉片解離程度主要取決于________的濃度。

②制備的原生質體應置于濃度__________________馬鈴薯葉片細胞液濃度的溶液中進行培養，以保持原生質體的正常形態。

（2）為了便于在顯微鏡下對雜種細胞進行鏡檢篩選，將用四倍體馬鈴薯葉片制備的原生質體與用

野生型馬鈴薯的__________（填“葉片”或“幼根”）為材料制備的原生質體進行融合。把兩種原生質體置于加入__________的溶液中促融。

（3）為進一步從染色體水平上檢測雜種植株，科學家選取雜種植株根尖進行__________后用堿性染料染色并制片，顯微鏡下對__________期的細胞進行染色體計數。

（4）為達到育種目標，還需要對雜種植株進行______抗性檢測以篩選得到抗性馬鈴薯。

Answer 1

【答案】 5 果膠酶 略高于或等于 幼根 PEG或聚乙二醇 解離、漂洗 有絲分裂中期 青枯病

【解析】本題主要考查植物體細胞雜交。要求學生熟知植物體細胞雜交的過程，以及對雜交結果的檢測。同時還考查了對表格的分析能力。

（1）①據表分析，制備原生質體的最佳組合是第5組，其原生質體的產量最高。根據第1組和第2組、第3組和第4組的纖維素酶濃度相同，果膠酶濃度不同，實驗結果原生質的產量不同，可知：葉片解離程度主要取決于果膠酶的濃度。
②制備的原生質體應置于濃度略高于或等于馬鈴薯葉片細胞液濃度的溶液中進行培養，以保持原生質體的正常形態。濃度相差較大，原生質體會發生滲透失水或吸水。
（2）可根據染色體的形態和數目對雜種細胞進行鏡檢篩選，將用四倍體馬鈴薯葉片制備的原生質體與用野生型二倍體馬鈴薯的幼根為材料制備的原生質體進行融合．（幼根有分裂增殖能力，能觀察到染色體）。把兩種原生質體置于加入PEG（或“聚乙二醇”）的溶液中促融．
（3）為進一步從染色體水平上檢測雜種植株，顯微鏡下觀察細胞的有絲分裂，應對雜種植株根尖進行解離、漂洗后用堿性染料染色并制片，選擇有絲分裂中期的細胞進行染色體計數，因為中期的染色體數目更清晰。
（4）為達到育種目標，還需要進行個體水平的鑒定，即對雜種植株進行青枯病抗性檢測以篩選得到抗性馬鈴薯新種．