Question

【題目】用抗人絨毛膜促性腺激素單克隆抗體做成的“早早孕診斷試劑盒”，靈敏度很高，在妊娠第8天就可以做出診斷，下圖是抗HCG單克隆抗體制備流程示意圖（HCG：人絨毛膜促性腺激素）。

（1）制備單克隆抗體過程中，給小鼠注射的HCG相當于___________，它能使小鼠產生___________細胞，此過程屬于特異性免疫中的體液免疫。

（2）B細胞DNA合成途徑有兩條，途徑①：由氨基酸及其他小分子化合物合成核苷酸，為DNA分子的合成提供原料（此途徑可被氨基喋呤阻斷）；途徑②：利用次黃嘌呤和鳥嘌呤磷酸核苷轉移酶（HGPRT）和胸腺嘧啶核苷激酶（TK）催化次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷生成相應的核苷酸，為DNA分子合成提供原料。骨髓瘤細胞DNA合成只有途徑①。HAT培養基是指在普通動物細胞培養液中加入次黃嘌呤、氨基喋呤和胸腺嘧啶脫氧核苷三種物質的液體培養基。

據此推測：若用A表示骨髓瘤細胞，B表示效應B細胞，加促融劑后，試管中的細胞類型有___________（用字母表示，不考慮三個及以上細胞融合類型）。在HAT培養液中，______________________類型細胞DNA 合成途徑①被氨基喋呤阻斷，雖然途徑②正常，但因缺乏在體外培養液中增殖的能力，一般10天左右會死亡。___________類型細胞本身缺少DNA合成途徑②，其途徑①被___________阻斷，所以不能增殖很快死亡。只有AB雜交瘤細胞能在HAT培養基中存活下來，原因是______________________。

Answer 1

【答案】抗原分泌相應抗體的淋巴（或漿或B淋巴）A、B、AA、BB、ABB、BBA、AA氨基喋呤雜交瘤細胞DNA合成途徑有兩條，雖然途徑①被氨基喋呤阻斷，但是途徑②可合成DNA，保證雜交瘤細胞的不斷分裂增殖

【解析】

單克隆抗體的制備過程：首先用特定抗原注入小鼠體內，小鼠體內產生具有免疫能力的B淋巴細胞，利用動物細胞融合技術將B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合，經過三次篩選：①篩選得到雜交瘤細胞（去掉未雜交的細胞以及自身融合的細胞），②篩選能夠產生單一抗體的B淋巴細胞，③篩選出能夠產生特異性抗體的細胞群。細胞融合是隨機的，可能產生瘤、B、瘤瘤、BB、瘤B等不同類型細胞，在HAT培養基中培養，可篩選出雜交瘤細胞，得到既具有效應B細胞的分泌抗體的特性，又具有骨髓瘤細胞在體外培養液中長期增殖特性的雜交瘤細胞。

（1）給小鼠注射的HCG相當于抗原，可誘導小鼠產生能分泌相應抗體的效應B淋巴或漿細胞。

（2）若用A表示骨髓瘤細胞，B表示效應B細胞，加促融劑后，試管中的細胞類型有A、B、AA、BB、AB。由于A細胞可在體外增殖，B細胞無體外增殖的能力，因此在HAT培養液中，B、BB類型細胞因缺乏在體外培養液中增殖的能力，一般10天左右會死亡；氨基喋呤可阻斷途徑①，故A、AA類型細胞本身缺少DNA合成途徑②，途徑①也被氨基喋呤阻斷，最終也很快死亡。只有AB雜交瘤細胞能在HAT培養基中存活下來，原因是雜交瘤細胞DNA合成途徑有兩條，雖然途徑①被氨基喋呤阻斷，但是途徑②可合成DNA，保證雜交瘤細胞的不斷分裂增殖。