Question

【題目】轉基因抗蟲棉是人們應用較早的基因重組技術推廣項目，目前轉基因技術有了新的改進，如下圖所示，請根據所學知識回答：

(1)圖中轉基因過程通常選擇的限制酶是_______________，基因工程所用DNA連接酶有兩類，其中只能連接黏性末端的是______________DNA連接酶，啟動子的作用是與_______識別和結合，從而驅動基因的轉錄過程。

(2)圖中需要進行離體組織培養的過程是______(用標號)。由棉株1獲得單倍體苗的途徑為：花粉通過誘導首先形成________進而再分化為試管苗。植物組織培養的原理是每個細胞都具有________的特點

(3)若確定目的基因（抗蟲基因已導入受體細胞，而要繼續確定目的基因是否成功表達）可在分子水平上采用進行________技術檢測，在個體生物學水平上鑒定是進行_______。

(4)種植該基因植物時，為避免它所攜帶的抗蟲基因通過花粉傳遞給近緣物種，造成“基因污染”，則應把抗蟲基因導入到葉肉細胞的________DNA中

Answer 1

【答案】 EcoRI和BamHI E.coli RNA聚合酶 ①和③ 愈傷組織 全能性 抗原—抗體雜交 抗蟲接種試驗 線粒體

【解析】【試題分析】本題主要考查基因工程和植物細胞工程有關知識的應用。

（1）載體和含有目的基因的外源DNA中均含有限制酶EcoRI、SamⅠ和BamHI的切割位點，但限制酶SamⅠ的切割位點位于目的基因上，不能用該酶進行切割，因此切割獲取目的基因時應選擇限制酶EcoRI和BamHI；基因工程所用DNA連接酶有兩類：Ecoli DNA連接酶和T4 DNA連接酶，其中只能連接黏性末端的是Ecoli DNA連接酶，啟動子是RNA聚合酶的識別和結合位點；

（2）圖中需要進行離體組織培養的是①花藥離體培養和③受體細胞培養成棉株2；由棉株1獲得單倍體苗的途徑為：花粉通過誘導首先脫分化形成愈傷組織，進而再分化為試管苗；植物組織培養的原理是植物體的任何一個細胞都具有生長分化成為一個完整植株的能力，稱為植物的全能性；

(3)抗蟲基因已導入受體細胞，而要繼續確定目的基因是否成功表達，即檢測目的基因是否翻譯成蛋白質，在分子水平上采用抗原—抗體雜交技術；因導入的是抗蟲基因，故在個體生物學水平上鑒定是進行抗蟲接種試驗；

（4）為避免抗蟲基因通過花粉傳遞給近緣物種，造成“基因污染”，則應把抗蟲基因導入到葉肉細胞的葉綠體(或線粒體)DNA中，因葉綠體(或線粒體)遺傳表現為母系遺傳，目的基因不會通過花粉傳遞。