Question

【題目】動畫電影《你的名字》中女主制酒的方式十分獨特，這種方法制作出來的酒被命名“口嚼酒”。

（1）口嚼酒的做法：首先需要先將米煮熟，然后放入口中咀嚼一段時間。直至米粒變為糊狀，再將其吐出裝入特制容器，令其發酵。在口中咀嚼的作用可能是 ____________________。參與口嚼酒形成初期的微生物主要是來自空氣中的 ________。末期形成酸味，可能是因為密封不嚴產生了_________等物質。

（2）口嚼酒是一種自釀酒，衛生條件難以把握，會有雜菌滋生的危險。某生物興趣小組想探究口嚼酒制作過程中會滋生哪些微生物。進行了進一步的實驗，請完善并分析實驗步驟：

①制作口嚼酒

②制作培養基：計算→稱量→溶化→______________→倒平板

③接種：每天同一時間將口嚼酒液體搖勻后，按照圖甲和圖乙的方法進行操作。該方法是____________________，并且在每天接種的培養皿上注明培養日期，將所有培養基放在相同且適宜的環境下培養。

（3）經過一段適宜時間后，觀察不同培養基上的菌落數和菌落的形態，并進行品種鑒定。圖丙是三個不同時間獲得的培養基。其時間先后為____________(填字母)。

（4）上述實驗在時間上已形成前后對照，但是還需要設置一個空白對照。目的是____________。

（5）興趣小組成員發現在實驗后期的培養基上長滿了許多雜菌菌落。若他們采用圖丁的方法，對雜菌中的目的菌進行純化。則在_______（填數字）區最可能獲得純凈的目的菌。

Answer 1

【答案】磨碎米粒并利用口腔中的唾液淀粉酶初步水解淀粉 酵母菌 醋酸 滅菌 稀釋涂布平板法 B、C、A 排除培養基本身被污染的可能性 5

【解析】

本題綜合考查了果酒、果醋制作的原理，微生物的實驗室培養方面的相關知識。

（1）釀酒的原理是酵母菌在無氧條件下，利用葡萄糖進行無氧呼吸，產生酒精和二氧化碳。米粒的成分主要是淀粉，淀粉首先在淀粉酶的作用下分解成葡萄糖，然后葡萄糖再被酵母菌利用進行無氧呼吸產生酒精和二氧化碳。由于口腔的唾液中含有淀粉酶，所以米粒在口腔中咀嚼一段時間米粒變為糊狀，這時口腔內的淀粉酶可起到初步水解淀粉的作用。由于在釀酒過程中沒有加入酵母菌，所以釀酒初期所需要的微生物主要是來自空氣中的酵母菌。發酵末期形成酸味，說明產生的酒精變成了酸性物質，這種酸性物質應該是醋酸。因為釀醋的原理是醋酸菌可在有氧條件下將乙醇變為乙醛，再將乙醛變為醋酸。因此當釀酒時如果密封不嚴時，就可能混入醋酸菌，從而使酒精被醋酸菌氧化成醋酸。（2）在實驗室培養微生物，首先應制備培養基，制備培養基的步驟是：1、計算、2、稱量、3、溶化、4、滅菌、5、倒平板。然后接種微生物，接種微生物常用的方法有平板劃線法或稀釋涂布平板法。由圖甲、乙可知，該題的操作為稀釋涂布平板法，甲是取少量菌液，乙是用涂布器將菌液均勻地涂布在培養基表面。（3）經過一段時間培養，隨著時間的推移，微生物在培養基上大量繁殖，培養基上就會長出菌落，菌落越來越明顯，而且菌落數也會增多最終趨于穩定，這時就可以計數了。因此就丙圖來說，其時間先后為B、C、A。（4）在接種微生物時，為了防止由于培養基被污染，或者操作不規范而造成污染培養基，常用的方法是在接種微生物的同時，設置一個未接種的培養基作空白對照。（5）由圖丁所示的菌落形態可知這是通過平板劃線法得到的菌落。平板劃線法是通過接種環在瓊脂固體培養基表面連續劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養基的表面。在數次劃線后培養，可以分離到由一個細胞繁殖而來的菌落。平板劃線法的起始點是從1開始，依次經過2、3、4劃線，最終到5結束。因此要獲得純凈的目的菌，應從5位置挑選單個菌落。