Question

【題目】葡萄酒酵母（C1)具有良好的發酵性能，但分解蘋果酸能力差，過多的蘋果酸會使葡萄酒有酸澀感，解蘋果酸裂殖酵母（Ml)具有極強的降解蘋果酸能；但發酵性能極差。為了培育新型酵母菌菌種，科研人員采用了以下步驟進行育種。請分析回答：

（1）步驟一：制備原生質體。培養Cl、Ml單倍體親株，加入一定量的0.5%的蝸牛酶液，保溫處理一段時間，用一定濃度的高滲緩沖液洗滌，以確保獲得更多的原生質體。

①本實驗中，蝸牛酶液的作用是______________。

②在無菌條件下，用___________(A：高滲緩沖液、B:低滲緩沖液、C：生理鹽水）洗滌，以確保獲得更多的原生質體。

③改變蝸牛酶液濃度進行多組實驗，結果見圖1,分別計算酶濃度為1和1.5時的形成率與再生率，相比較酶濃度為_______________時更適宜。

（2）步驟二：誘導原生質體融合。取Cl、Ml原生質體懸浮液等量混合，離心去除上清液，加入一定量40%的_________溶液,30℃保溫20min，鏡檢并觀察融合情況。

（3）步驟三：融合子的鑒定。測定細胞體積及DNA含量，結果見表1,從中挑選出融合子Z13、Z15、Z19、Z29,理由是_____________。

（4）步驟四：融合子發酵性能的測定。測定融合子與親株的降糖能力和降酸能力，圖2和圖3是對Z29和親株的測定結果，據圖分析可以得出的結論是__________的降糖能力和降酸能力均較好，表明 _________。

Answer 1

【答案】 去除細胞壁 A 1.5% 聚乙二醇（PEG） 細胞中DNA含量與兩親本的DNA含量之和接近（DNA含量為4或DNA含量在4左右、接近4） Z29 融合了兩親株的優良性狀

【解析】試題分析：本題考查細胞工程，考查對細胞融合方法的理解與識記，考查圖表曲線的分析能力。解答此類題目應明確研究目的和研究對象，從曲線圖或表格中提取相關信息。

（1）①酵母菌具有細胞壁，本實驗中，蝸牛酶液的作用是去除細胞壁。

②在無菌條件下，用高滲緩沖液洗滌，可以避免原生質體不破裂，以確保獲得更多的原生質體。

③酶濃度為1.5％時再生率較高，更適宜進行實驗。

（2）步驟二：聚乙二醇（PEG）可以促進細胞融合。

（3）融合子Z13、Z15、Z19、Z29細胞中DNA含量與兩親本的DNA含量之和接近（DNA含量為4或DNA含量在4左右、接近4），屬于雜合細胞。

（4）據圖2可知，Z29比M1降糖能力強，具圖3可知，Z29降酸能力比雙親均強，說明Z29的降糖能力和降酸能力均較好，表明Z29融合了兩親株的優良性狀。