Question

(13分)Ⅰ．如圖表示運(yùn)用基因工程技術(shù)生產(chǎn)胰島素的三條途徑。據(jù)圖結(jié)合所學(xué)知識(shí)回答下列問(wèn)題：

(1)為了便于將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)，所選擇的質(zhì)粒上應(yīng)該具有__________________。

(2)培育轉(zhuǎn)基因羊的過(guò)程中，科研人員通過(guò)感染或____________技術(shù)將重組質(zhì)粒M轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞A中，受體細(xì)胞A應(yīng)該是________細(xì)胞。③過(guò)程中還用到了__________________技術(shù)。

(3)受體細(xì)胞B應(yīng)該是萵苣的________(填“體細(xì)胞”“卵細(xì)胞”或“受精卵)，導(dǎo)入該細(xì)胞后，需對(duì)該細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，經(jīng)________過(guò)程形成愈傷組織。

(4)萵苣為雙子葉植物，過(guò)程②常用的方法是________________；過(guò)程⑥常用的方法是用________來(lái)處理大腸桿菌，使其易于吸納重組質(zhì)粒M。

Ⅱ、下圖四種質(zhì)粒含有E₁和E₂兩種限制酶的識(shí)別位點(diǎn)，Ap^r表示抗青霉素的抗性基因，Tc^r表示抗四環(huán)素的抗性基因。

(1)將兩端用E₁切開(kāi)的AP^r基因與用E₁切開(kāi)的質(zhì)粒X-1混合連接，連接后獲得的質(zhì)粒類(lèi)型有________（2分）。(可多選)

A．X-1    B．X-2

C．X-3    D．X-4

(2)若將上圖所示X-1、X-2、X-3、X-4四種質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌，然后分別涂布在含有青霉素或四環(huán)素的兩種培養(yǎng)基上。在四環(huán)素的培養(yǎng)基不能生長(zhǎng)的大腸桿菌細(xì)胞類(lèi)型有________、________、__________。

 

Answer 1

【答案】

Ⅰ（1）標(biāo)記基因   （2）顯微注射   受精卵    動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、胚胎移植

（3）體細(xì)胞   脫分化    （4）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法    鈣離子

Ⅱ（1）A、C     （2）無(wú)質(zhì)粒細(xì)胞     含X-1的細(xì)胞     含X-3的細(xì)胞

【解析】

試題分析：Ⅰ、(1)質(zhì)粒作為載體一般具有三個(gè)條件：有復(fù)制原點(diǎn)、有目的基因插入點(diǎn)、有標(biāo)記基因。標(biāo)記基因可以是抗生素抗性基因、熒光標(biāo)記基因等，它有利于目的基因的檢測(cè)。

(2)在動(dòng)物基因工程中，可利用顯微注射法將重組質(zhì)粒導(dǎo)入到受精卵細(xì)胞中，因?yàn)槭芫�卵比較大，易操作，并且受精卵的全能性高。受精卵可以用早期胚胎培養(yǎng)培養(yǎng)到桑椹胚或者囊胚，在通過(guò)胚胎移植技術(shù)導(dǎo)入到受孕母羊體內(nèi)。

(3)植物基因工程中，一般利用體細(xì)胞作為受體細(xì)胞，然后利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)首先進(jìn)行脫分化形成愈傷組織，然后再進(jìn)過(guò)再分化形成胚狀體進(jìn)而發(fā)育成完整植株。

(4)雙子葉植物一般利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞。當(dāng)受體細(xì)胞是細(xì)菌時(shí)，常用Ca²⁺處理，得到感受態(tài)細(xì)胞，此時(shí)細(xì)胞壁和細(xì)胞膜的通透性增大，容易吸收重組質(zhì)粒。

Ⅱ、（1）用E1切開(kāi)的質(zhì)粒X－1后，該質(zhì)粒不含AP^r基因，因此AP^r基因與用E1切開(kāi)的質(zhì)粒X－1混合后，可能有三種結(jié)果，AP^r基因自身環(huán)化、質(zhì)粒X－1自身環(huán)化（X-3）、AP^r基因和質(zhì)粒X－1重新組合（X-1），有自身環(huán)化連接形成的X-1、X-3，故選A、C。

（2）Tc^r表示抗四環(huán)素的抗性基因，因此質(zhì)粒中含有Tc^r基因的導(dǎo)入大腸桿菌中，大腸桿菌不死亡，即圖中X-2和X-4兩種質(zhì)粒，因此無(wú)質(zhì)粒細(xì)胞、含X-1的細(xì)胞、含X-3的細(xì)胞均不能生長(zhǎng)。

考點(diǎn)：本題考查了基因工程的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)與觀點(diǎn)，通過(guò)比較、分析與綜合等方法對(duì)某些生物學(xué)問(wèn)題進(jìn)行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論的能力；從題目所給的圖形中獲取有效信息的能力。