Question

【題目】回答下列有關生物技術與基因表達的問題

如圖所示為利用現代生物技術獲得能表達某蛋白酶工程菌的過程及工程菌表達目的基因的模式圖。選用的質粒A上有I、II、III、IV四種限制酶切割位點。

（1）據圖推斷過程①獲取目的基因時，應選用的限制酶是______________。過程②是利用___________酶將目的基因與運載體連接形成重組質粒。過程③為重組質粒導入受體細胞，如受體細胞為小鼠受精卵，則選用的常規方法是_______________。

（2）如同時用酶I和酶IV切割圖中質粒A，產生1.8kb和8.2kb的兩種片段（1kb=1000對堿基對），如用四種酶同時切割質粒A，則產生0.6kb和8.2kb兩種片段，那么用同時用酶II和酶IV切割質粒A，則產生的片段有____________。

（3）過程⑤表示______________過程，其需要的原料是_______________。

Answer 1

【答案】II和III DNA連接酶 顯微注射 1.2kb和8.8kb 轉錄 四種游離的核糖核苷酸

【解析】

本題旨在考查基因工程與基因表達的相關知識。分析題圖：①提取目的基因，②目的基因與運載體結合，③將目的基因導入受體細胞，④目的基因的表達，⑤目的基因表達過程中的轉錄；選用的質粒A上有I、II、III、IV四種限制酶切割位點，獲取目的基因的DNA分子上有I、II、III三種限制酶切割位點，選用I限制酶切割位點將會破壞目的基因，故選用II、III兩種限制酶切割目的基因與運載體質粒。

（1）質粒A上有I、II、III、IV四種限制酶切割位點，獲取目的基因的DNA分子上有I、II、III三種限制酶切割位點，據圖推斷過程①獲取目的基因時，選用I限制酶切割位點將會破壞目的基因，故選用II、III兩種限制酶；兩種來源不同的DNA用同種限制酶切割后，末端互補的堿基可以連接起來，脫氧核糖和磷酸交替連接而構成的DNA 骨架上的缺口，需要靠DNA連接酶來“縫合”，將目的基因與運載體連接形成重組質粒。重組質粒導入動物受體細胞，選用的常規方法是顯微注射法。

（2）如同時用酶I和酶IV切割圖中質粒A，產生1.8kb和8.2kb的兩種片段（1kb=1000對堿基對），說明質粒上含有10000個堿基對；如用四種酶同時切割質粒A，則產生0.6kb和8.2kb兩種片段，則說明酶I和酶II、酶II和酶III、酶III和酶IV切割位點間的都含有600個堿基對，那么同時用酶II和酶IV切割質粒A，則產生的片段有600+600=1200對堿基（酶II、酶III和酶IV之間的堿基）和8200+600=8800對堿基（酶IV、酶Ⅰ和酶II之間的堿基），故則產生的片段有1.2kb和8.8kb。

（3）過程⑤遺傳信息傳遞的過程為DNA→RNA，表示轉錄過程，其需要的原料是四種游離的核糖核苷酸。