Question

【題目】某公司在新冠防疫期間推出一款新型免洗洗手凝膠，為衡量該凝膠的清洗效果，研究人員檢測了凝膠洗手前后，手部細菌的數量。凝膠洗手前后的檢測流程見下圖，回答下列問題：

（1）在進行實驗前需要配置培養基，各種培養基的具體配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源、___________。如果培養乳酸桿菌，還需要在培養基中添加____________。

（2）為統計洗手前后手部細菌的數量，應選擇的接種方法是____________。若在M稀釋倍數下統計出平板上的菌落數為N，涂布平板時所用的液體體積為V（ml），那么每克樣品中的菌數為___________，而實際菌數要比計算值___________。

（3）根據上圖所示的步驟得出的實驗結果的可信度較低，為了提高實驗結果的可信度，請給出兩點建議：______________________、_________________________________。

（4）培養一段時間后可根據______________________（至少填兩項）等菌落特征初步判斷培養基上菌種的類型。

Answer 1

【答案】無機鹽 維生素（或生長因子） 稀釋涂布平板法 N/V×M 大 同一個稀釋度下涂布三個平板，取三個平板上菌落數的平均值 設置一組未接種的空白培養基，排除雜菌污染對實驗結果造成的干擾 菌落的大小、形狀（隆起程度和顏色）

【解析】

培養基的營養構成：各種培養基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養物質以及氧氣的要求。例如，培養乳酸桿菌時需要在培養基中添加維生素，培養霉菌時需將培養基的pH調至酸性，培養細菌時需將pH調至中性或微堿性，培養厭氧微生物時則需要提供無氧的條件。單菌落分離法包含平板劃線分離法和稀釋涂布平板法分離，常用于分離獲得單菌落。其中稀釋涂布平板法可用于菌體計數。

（1）無機鹽對維持生命活動非常重要，各種培養基的具體配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽。有些微生物的培養還需要在培養基中加入生長因子，如培養乳酸桿菌。

（2）為統計洗手前后手部細菌的數量，應選擇的接種方法是稀釋涂布平板法。若在M稀釋倍數下統計出平板上的菌落數為N，涂布平板時所用的液體體積為V（ml），那么每克樣品中的菌數為N/V×M，由于計數時當兩個或幾個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，所以實際菌數要比計算值偏大。

（3）為了提高實驗結果的可信度，需要檢測培養基滅菌是否合格以及在同一稀釋度下計數多個平板上的菌落數并求平均值，即提出的建議為：在同一個稀釋度下涂布三個平板，取三個平板上菌落數的平均值；設置一組未接種的空白培養基，排除雜菌污染對實驗結果造成的干擾。

（4）培養一段時間后可根據菌落的大小、形狀（隆起程度和顏色）等菌落特征初步判斷培養基上菌種的類型。