Question

【題目】科研人員采用轉基因體細胞克隆技術獲得轉基因綿羊，以便通過乳腺生物反應器生產人凝血因子IX醫用蛋白，其技術路線如圖所示：

（1）研究人員在過程①中，利用PCR技術擴增人凝血因子IX基因時，除了酶、引物、模板以外，還需要加入____________作為合成DNA的原料；PCR過程中需要不斷調整反應體系的溫度，一般情況下，至少需要______個不同的反應溫度。

（2）通過步驟②獲得的A，除了人凝血因子IX基因外，還含有_______________________（至少三個）等結構。

（3）過程④指_______________，重組胚胎可以與普通代孕母羊的子宮建立正常的生理和組織聯系，但是出生后的轉基因綿羊依然具有生產人凝血因子IX醫用蛋白的能力，原因是___________________________________。

（4）理論上，可以通過少量整合有目的基因的成纖維細胞，克隆出大量轉基因綿羊，請對這一問題做出兩個合理的解釋： ___________________；____________________。

Answer 1

【答案】 dATP、dGTP、dCTP、dTTP（或dNTPs） 3 啟動子、終止子、復制原點、標記基因 胚胎移植 移入受體的供體胚胎的遺傳特性，在孕育過程中不受任何影響 整合有目的基因的成纖維細胞可以進行傳代培養 轉基因綿羊的體細胞可以作為供體細胞，克隆更多轉基因綿羊

【解析】試題分析：本題綜合考查學生對基因工程的知識的識記和理解能力。解答本題需熟記并理解基因工程的基本操作程序并形成清晰的知識網絡。在此基礎上，結合問題情境，從題意和題圖中提取有效信息并與胚胎工程、核移植等知識建立聯系，進行相關問題的解答。

(1)利用PCR技術擴增人凝血因子IX基因時，除了酶、引物、模板以外，還需要加入dATP、dGTP、dCTP、dTTP（或dNTPs）。PCR過程中需要不斷調整反應體系的溫度，一般情況下，至少需要3個不同的反應溫度，即溫度上升到90℃至95℃時雙鏈DNA解聚為單鏈，溫度降到55℃至60℃時兩種引物通過堿基互補配對與兩條DNA單鏈結合，溫度上升到70℃至75℃時進行子鏈的延伸。

(2)通過步驟②獲得的A為基因表達載體，該基因表達載體除了人凝血因子IX基因（目的基因）外，還含有啟動子、終止子、復制原點、標記基因。

(3)過程④指胚胎移植。由于移入受體的供體胚胎的遺傳特性，在孕育過程中不受任何影響，所以出生后的轉基因綿羊依然具有生產人凝血因子IX醫用蛋白的能力。

(4)因整合有目的基因的成纖維細胞可以進行傳代培養，加之轉基因綿羊的體細胞可以作為供體細胞，克隆更多轉基因綿羊，所以理論上，可以通過少量整合有目的基因的成纖維細胞，克隆出大量轉基因綿羊。