Question

【題目】降鈣素是一種多肽類激素，某科學機構為了研究一種新型降鈣素，從預期新型降鈣素的功能出發，推測相應的脫氧核苷酸序列，并人工合成了兩條DNA單鏈，兩條鏈形成部分雙鏈DNA片段，再利用Klenow酶補平，獲得雙鏈DNA，過程如圖．在此過程中發現，合成較長的核苷酸單鏈易產生缺失堿基的現象．分析回答下列問題：
（1）上述制備新型降鈣素，運用的現代生物工程技術是 ． Klenow酶是一種酶．兩條DNA單鏈能合成部分雙鏈DNA的原因是 ．
（2）獲得的雙鏈DNA經限制酶切后插入到大腸桿菌質粒中，篩選含重組質粒的大腸桿菌并進行DNA測序驗證． ①要進行重組質粒的鑒定和選擇，需要大腸桿菌質粒中含有 ．
②導入大腸桿菌時，要用處理．
③經DNA測序表明，最初獲得的多個重組質粒，均未發現完全正確的基因序列，最可能的原因是 ．

Answer 1

【答案】
（1）蛋白質工程； DNA聚合酶；兩條DNA單鏈中存在互補配對的堿基
（2）標記基因； Ca2+；合成的DNA單鏈較長,堿基發生了缺失
【解析】解：（1）根據材料中“從預期新型降鈣素的功能出發，推測相應的脫氧核苷酸序列，獲得雙鏈DNA”，可以確定運用的現代生物工程技術是蛋白質工程．由圖可知Klenow酶能夠將單鏈DNA延伸，可見它是一種DNA聚合酶．由于兩條DNA單鏈中存在互補配對的堿基，因此兩條DNA單鏈能合成部分雙鏈DNA．（2）①基因工程中，重組質粒的鑒定和選擇依靠標記基因．

②大腸桿菌為微生物，作為基因工程的受體細胞，需要用Ca2+處理大腸桿菌，使其處于感受態．

③如上圖，在合成DNA雙鏈時，如果合成的核苷酸單鏈較長，容易發生缺失堿基的現象．會引起最初獲得的多個重組質粒，均未發現完全正確的基因序列的可能．

所以答案是：（1）蛋白質工程 DNA聚合酶 兩條DNA單鏈中存在互補配對的堿基（2）標記基因 Ca2+ 合成的DNA單鏈較長，堿基發生了缺失

【考點精析】掌握基因工程的原理及技術和蛋白質工程是解答本題的根本，需要知道基因工程的原理是利用DNA重組技術；蛋白質工程是指以蛋白質分子的結構規律及其生物功能的關系作為基礎，通過基因修飾或基因合成，對現有蛋白質進行改造，或制造一種新的蛋白質，以滿足人類的生產和生活的需求．