Question

【題目】三位高中生在某個炎熱夏日相約去吃冰激凌，之后兩人都出現腹瀉現象，于是他們懷疑冰激凌中的大腸桿菌含量超標。老師建議他們利用所學有關微生物培養的知識對冰激凌進行檢測。經查閱資料后，他們提出如下實驗設計思路。

立即去賣冰激凌的小店再買一個同樣品牌的同種冰激凌；配制伊紅-亞甲基瓊脂培養基（該培養基可用來鑒別大腸桿菌，生長在此培養基上的大腸桿菌菌落呈現深紫色，并有金屬光澤）、滅菌、倒平板；取10mL剛融化的冰激凌作為原液，然后進行梯度稀釋，稀釋倍數為1×10～1×105；取每個濃度的冰激凌液各0．1mL，用涂布平板法進行接種，每個濃度涂3個平板；在適宜溫度下培養48小時，統計菌落數目。

（1）請你從下面3個角度對這三位同學的思路進行評議。

① 他們只打算對一個冰激凌進行檢測，理由是：兩個人吃過冰激凌后，都腹瀉了，所以再檢測一個就足以說明問題。你同意這樣的觀點嗎？請闡述理由__________________。

② 有沒有必要對冰激凌原液進行梯度稀釋？請闡述理由____________________。（提示：我國衛生部門規定的飲用水標準是：37oC培養24h的條件下1mL自來水中細菌總數不可以超過100個；37oC培養48h的條件下1000mL自來水中大腸桿菌菌落不能超過3個）

③ 他們認為，在用該方法統計菌落數目時不需要設計對照組，所以只準備培養15個平板。你認為在這項檢測中是否需要對照組？請闡述理由__________________。

（2）下圖所示為4種菌落分布圖，一般不能由涂布平板法得到的是_______。

（3） 如果以菌落數代表樣品中的大腸桿菌數量，則統計結果比實際值是偏大還是偏小？請闡述理由__________________。

（4）如果實驗結果顯示檢測的冰激凌中大腸桿菌超標了，接下來他們應該做什么？_____。

（5）2020年5月1日起，北京市實行新版《北京市生活垃圾管理條例》，在下列垃圾類別中，冰激凌包裝袋、雪糕棒等屬于_______。

A、廚余垃圾B、可回收物C、有害垃圾D、其他垃圾

Answer 1

【答案】不同意，因為檢測樣品少，不能確定是某個冰激凌的質量問題還是這個品牌冰激凌的質量問題 有必要，培養基的菌落數在30-300之間易于平板計數，如不稀釋，可能會因菌落數過密而無法計數 需要，排除空白平板等無關變量對結果無干擾 D 偏小，因為兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落。（偏大，在操作過程中被大腸桿菌污染，可能數目會增加） 向商家說明情況，或向有關部門投訴 D

【解析】

微生物的培養計數時使用稀釋涂布平板法，統計公式為：C/V×M，其中C表示平均菌落數，V表示接種到平板上的菌液體積，M表示稀釋倍數。

（1）①不同意，檢測一個不能說明問題，具有偶然性，檢測樣品少，不能確定是某個冰激凌的質量問題還是這個品牌冰激凌的質量問題；

②為了好計數，使培養基的菌落數在30-300之間易于平板計數，有必要稀釋，如不稀釋，可能會因菌落數過密而無法計數；

③需要設置對照組，要檢測培養基滅菌是否合格，以及排除空白平板等無關變量對結果無干擾；

（2）D圖中菌落沒有均勻生長，還有明顯的劃線痕跡，是平板劃線法接種得到的，D不能由涂布平板法得到；

（3）嚴格無菌操作時，會偏小，當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落；沒有嚴格無菌操作時，也有可能會偏大，當操作過程中被大腸桿菌污染，可能數目會增加；

（4）如果實驗結果顯示檢測的冰激凌中大腸桿菌超標了，應該向商家說明情況，或向有關部門投訴；

（5）冰激凌包裝袋、雪糕棒等屬于其他垃圾，故選D。