Question

【題目】動物細胞培養技術是動物細胞工程的基礎，在動物細胞工程的其他技術中都得廣泛應用（如圖）．下面是與動物細胞工程相關的問題，請分析回答：
（1）在進行動物細胞培養時，首先要將動物組織剪碎，然后用處理，以分散成單個細胞，制成細胞懸液．
（2）動物細胞培養時，要保證細胞必需的營養、適宜的溫度和pH條件，還要提供無菌、無毒和適宜的氣體環境．為達到無菌、無毒的環境條件，除了要對培養液和培養器具進行消毒外，還要① ， ② ． 氣體環境中CO2的作用是 ．
（3）應用于核移植的供體細胞一般選用傳代10代以內的細胞，原因是 ．
（4）如圖表示單克隆抗體的制備過程，給小鼠注射特定抗原后產生的、與骨髓瘤細胞融合的細胞是 ． 在細胞融合的過程中，常用的化學誘導劑是；篩選出的雜交瘤細胞所表現出的優良性狀是 ．

Answer 1

【答案】
（1）胰蛋白酶（膠原蛋白酶）
（2）在培養液中加入一定量的抗生素；定期更換培養液；維持培養液的PH
（3）10代以后的細胞遺傳物質可能發生改變（或保證供體細胞正常的遺傳基礎）
（4）B淋巴細胞（漿細胞）；聚乙二醇（PEG）；可在體外條件下，無限增殖，又能分泌單一抗體
【解析】解：（1）在進行動物細胞培養時，動物組織需要用胰蛋白酶（膠原蛋白酶）處理分散成單個細胞，制成細胞懸液．（2）動物細胞培養時，要保證無菌、無毒的環境條件，可采用對培養液和培養器具進行消毒、在培養液中加入一定量的抗生素、定期更換培養液．氣體環境中CO2的作用是維持培養液的PH．（3）10代以后的細胞遺傳物質可能發生改變（或保證供體細胞正常的遺傳基礎），因此在核移植技術中供體細胞一般選用傳代10代以內的細胞．（4）在單克隆抗體的制備過程中，給小鼠注射特定抗原后，產生的具有免疫能力的B淋巴細胞（漿細胞），常用的化學誘導劑是聚乙二醇（PEG）誘導具有免疫能力的B淋巴細胞（漿細胞）與骨髓瘤細胞融合．篩選出的雜交瘤細胞具有在體外條件下無限增殖，又能分泌單一抗體的優良性狀． 所以答案是：（1）胰蛋白酶（膠原蛋白酶）（2）①在培養液中加入一定量的抗生素　②定期更換培養液、維持培養液的PH（3）10代以后的細胞遺傳物質可能發生改變（或保證供體細胞正常的遺傳基礎）（4）B淋巴細胞（漿細胞）　聚乙二醇（PEG）可在體外條件下，無限增殖，又能分泌單一抗體
【考點精析】關于本題考查的動物細胞與組織培養過程和單克隆抗體的制備，需要了解取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉入培養瓶中進行原代培養→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續傳代培養；對免疫小鼠注射特定的抗原蛋白；提取B淋巴細胞；同時用動物細胞培養的方法培養骨髓瘤細胞并提取；促使它們細胞融合；在特定的選擇培養基上篩選出融合的雜種細胞；然后對它進行克隆化培養和抗體檢測；最后將雜交瘤細胞在體外做大規模培養或注射入小鼠腹腔內增殖，從細胞培養液或小鼠腹水中可得到大量的單克隆抗體才能得出正確答案．