Question

【題目】馬鈴薯塊莖含有大量的淀粉，富含多種維生素和無機鹽，我國已將馬鈴薯作為主糧產品進行產業化開發。下圖是轉基因抗鹽馬鈴薯的培育過程，請分析回答問題：

（1）為獲取抗鹽基因，可以從堿蓬細胞研磨液中提取抗鹽基因的_________來合成cDNA。

（2）上圖構建基因表達載體時，最好選用_________酶切割含目的基因的外源DNA和質粒，不能使用Sma l切割的原因是_________________________________。構建好的重組質粒在抗鹽基因前要加上特殊的啟動子，啟動子是一段有特殊結構的_______片段。

（3）將基因表達載體導入農桿菌中的Ti質粒上的T-DNA上的原因是________。通過農桿菌的轉化作用，使抗鹽基因插入到馬鈴薯細胞中的染色體DNA上，從而使抗鹽基因的遺傳特性得以_________________。

（4）從個體水平上檢驗轉基因抗鹽馬鈴薯是否培育成功的方法是___________________。

Answer 1

【答案】（每空1分，共7分）（1）mRNA

（2）EcoRⅠ和HindⅢ SmaⅠ會破壞質粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因 DNA

（3）T-DNA是可以轉移的DNA 穩定維持和表達

（4）將轉基因馬鈴薯幼苗栽種在鹽堿地或較高濃度鹽溶液中，觀察是否能正常生長

【解析】（1）基因工程中，獲取目的基因時可以利用mRNA為模板，逆轉錄形成cDNA。

（2）圖中質粒的標記基因為抗生素抗性基因，而SmaI的切割位點就在該基因和目的基因上，因此用質粒和外源DNA構建重組質粒，不能使用SmaI切割，則應該用EcoRⅠ和HindⅢ酶切割含目的基因的外源DNA和質粒。基因表達載體中啟動子是一段有特殊結構的DNA片段。

（3）農桿菌中的Ti質粒上的T-DNA是可以轉移的DNA，可以將目的基因帶入馬鈴薯細胞，并將目的基因插入到馬鈴薯細胞中的染色體DNA上，從而使抗鹽基因的遺傳特性得以穩定維持和表達。

（4）檢驗轉基因抗鹽馬鈴薯是否培育成功，從個體水平上來講，可以將轉基因馬鈴薯幼苗栽種在鹽堿地或較高濃度鹽溶液中，觀察是否能正常生長。