Question

（09上海十四校聯考）（10分）許多微生物在工業中有廣泛的應用，如利用谷氨酸棒桿菌生產谷氨酸，谷氨酸是生產味精和食品添加劑的重要原料。利用酵母菌發酵制酒。請依據下列要求完成問題：

（一）具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精發酵菌種，對野生酵母菌進行誘變后通過篩選可以得到具有這些特性的突變菌。

1．誘變及篩選過程如下：

步驟1：野生菌液體培養一段時間后接受紫外線照射誘變處理。

步驟2：制備選擇培養基。在基本培養基的基礎上，注意添加          和調低          ，加瓊脂后滅菌，制成固體平板。

步驟3：將紫外照射后的菌液稀釋涂布平板，目的是          。

步驟4：依據                    篩選出突變菌。

2．利用獲得的突變菌和蔗汗進行酒精發酵實驗，除了將培養基滅菌、保持空間潔凈外，發酵過程中防止外來雜菌入侵還有哪些可行方法？請選擇：（    ）

①利用突變菌的耐酸特性，降低培養基的pH值，達到抑菌的目的；

②利用突變菌的耐高糖特性，通過高滲環境達到抑菌目的；

③保持厭氧環境，達到抑菌目的；

④在培養基中添加一些抑制物如特殊的抗生素，達到抑菌目的。

A．①②③④       B．①②③         C．①②④         D．①②

（二）某同學設計了下列實驗步驟，測定谷氨酸發酵中谷氨酸棒桿菌生長所需的最適pH值。實驗步驟：

①配制適宜的培養基分裝到5個錐形瓶中；

②用pH緩沖液分別調節pH為4.0、4.5、5.0、5.5、6.0，分別標號A、B、C、D、E

③將每瓶培養基等量分裝到3支試管中，加棉塞并包扎，每捆試管外掛上相應的標簽；

④在酒精燈上加熱煮沸10分鐘滅菌；

⑤在無菌條件下接種等量菌種；

⑥在37℃恒溫箱中培養24小時；

⑦測定每只試管中谷氨酸產量，并記錄、統計、分析結果。

（1）上述 步驟中有3個明顯的科學性錯誤，請指出，并按次序加以修正。

①                                             ；

②                                             ；

③                                             ．

設計一張表格，以統計實驗結果。

Answer 1

答案：

（一）1. 添加高濃度蔗糖（葡萄糖）；調低pH值；獲得單菌落：是否能在選擇培養基上生長。  2. A

（二）（1）②用PH緩沖液分別調節pH為4.0、4.5、5.0、5.5、6.0，①改正：6.5、7.0、7.5、8.0、8.5；

④在酒精燈上加熱煮沸10分鐘滅菌；  ②改正：在98Kpa高壓下蒸汽滅菌20分鐘；

⑦測定每只試管中谷氨酸產量，③改正：測定菌體的細胞數目或測重量（干重或濕重）。

（2）

編號 指標項

PH=6.5

PH=7.0

PH=7.5

PH=8.0

PH=8.5

I1

I2

I3

II2

II2

II3

III1

III2

III3

IV1

IV2

IV3

V1

V­2

V3

細菌數目或細菌重量

平均值