Question

【題目】復合型免疫缺陷癥（SCID）患者缺失ada基囚．利用基因療法將人正常ada基因轉入患者自身T細胞．可改善患者的免疫功能．如圖顯示該基因療法的兩個關鍵步驟．回答下列問題：
（1）圖中所示獲取正常ada基因的方法是 ， 若要大量獲取該基因，可通過PCR技術迸行擴增．與細胞內DNA復制過程相比，PCR技術的不同點有（答出兩點）
（2）步驟②是 ． 在該步驟中，病毒作為起作用，需使用的工具酶有 ．
（3）完成步驟②后，在體外將人正常ada基因導入患者自身的T細胞．此后，在將該T細胞重新輸入患者體內之前，還必須完成哪兩項操作？

Answer 1

【答案】
（1）從基因文庫中獲取目的基因；不需要解旋酶、需要熱穩定DNA聚合酶
（2）構建基因表達載體；運載體；限制酶和DNA連接酶
（3）將目的基因導入受體細胞、目的基因的檢測與表達
【解析】解：（1）圖中所示獲取目的基因的方法是從基因文庫中獲取目的基因；與細胞內DNA復制過程相比，PCR技術的不同點有：不需要解旋酶、需要熱穩定DNA聚合酶．（2）步驟②是構建基因表達載體．在該步驟中，病毒作為運載體起作用；構建基因表達載體時，首先需要限制酶切割運載體和含有目的基因的外源DNA分子，其次需要DNA連接酶將目的基因與運載體連接形成重組DNA分子．（3）基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取；②基因表達載體的構建；③將目的基因導入受體細胞；④目的基因的檢測與表達．因此完成步驟②后，在體外將人正常ada基因導入患者自身的T細胞．此后，在將該T細胞重新輸入患者體內之前，還必須完成的兩項操作為：將目的基因導入受體細胞、目的基因的檢測與表達． 所以答案是：（1）從基因文庫中獲取目的基因 不需要解旋酶、需要熱穩定DNA聚合酶（2）構建基因表達載體 運載體 限制酶和DNA連接酶（3）將目的基因導入受體細胞、目的基因的檢測與表達
【考點精析】認真審題，首先需要了解基因工程的原理及技術(基因工程的原理是利用DNA重組技術)．