Question

【題目】某研究小組從牛的瘤胃中采集樣本，進行分解尿素的微生物的分離與計數。實驗基本步驟如下：

（1）分解尿素的微生物含有_______________，因此，配制培養基時以尿素作為唯一氮源，尿素會被分解成_________使培養基的堿性增強。

（2）配制培養基時，需添加瓊脂，瓊脂起________________作用；培養基中添加___________作為指示劑，可使目標菌落的周圍產生紅色環帶。

（3）對尿素溶液進行滅菌的最適方法是___________滅菌。

A.高壓蒸汽 B.干熱 C.添加抗生素 D.過濾 E.紫外線照射 F.70﹪酒精浸泡

（4）該小組在接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養了一段時間，這樣做的目的是__________________________；然后將1mL瘤胃樣液稀釋1000倍，在3個平板上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液；經適當培養后，3個平板的菌落數分別為49、47和45。據此可得出每升瘤胃樣液中分解尿素的微生物活菌數為__________，理論上，統計的菌落數往往_____（低、等、高）于接種的實際活菌數目。

Answer 1

【答案】脲酶（分解尿素的酶）氨（NH3）凝固劑酚紅D檢測培養基平板滅菌是否合格4.7108低

【解析】注：答案錯誤，4.7×108

試題分析：常用 滅菌方法包括：高壓蒸汽滅菌適用于對一般培養基和玻璃器皿的滅菌；干熱滅菌適用于需要保持干燥的空玻璃器皿的滅菌，凡帶有橡膠的物品和培養基，都不能進行干熱滅菌；無菌室緩沖間和接種箱常用紫外線燈作空氣滅菌；微生物接種時的金屬接種工具和試管口可以用灼燒滅菌；煮沸滅菌通常不能徹底殺滅一些微生物的孢子和芽孢，一般適用于餐具或不耐高溫的食品等的消毒。

（1）分解尿素的酶是脲酶，所以分解尿素的微生物含有脲酶。尿素含有C、H、O、N元素，其水解產物是二氧化碳、水和氨氣，氨氣使得培養基的堿性增強。

（2）瓊脂是凝固劑，使得培養基呈固態；培養基中的堿性物質可以與酚酞反應產生紅色環帶。

（3）對尿素溶液進行滅菌的最適方法是高壓蒸汽滅菌法。

（4）空白平板的目的是檢測培養基平板滅菌是否合格；根據題干提供的數據進行計算，每升瘤胃樣液中分解尿素的微生物活菌數=（49+47+45）÷3×1000×10×1000=4.7×108。由于菌種可能重疊，所以統計的菌落數往往低于接種的實際活菌數目。