Question

2008年諾貝爾化學獎授予了三位在研究綠色熒光蛋白（GFP）方面做出突出貢獻的科學家。綠色熒光蛋白能在藍光或紫外光的激發下發出熒光，這樣借助GFP發出的熒光就可以跟蹤蛋白質在細胞內部的移動情況，幫助推斷蛋白質的功能。下圖為我國首例綠色熒光蛋白（GFP）轉基因克隆豬的培育過程示意圖，據圖回答：

 

    注：圖中通過過程①、②形成重組質粒，需要限制性內切酶切取目的基因、切割質粒。限制性內切酶Ⅰ的識別序列和切點是—G^↓GATCC—，限制性內切酶Ⅱ的識別序列和切點是—^↓GATC—。在質粒上有酶Ⅰ的一個切點，在目的基因的兩側各有1個酶Ⅱ的切點。

（1）在DNA連接酶的作用下，上述兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端能否連接起來        ，理由是：                                   。

（2）過程③將重組質粒導入豬胎兒成纖維細胞時，采用最多的方法是          。

（3）如果將切取的GFP基因與抑制小豬抗原表達的基因一起構建到載體上，GFP基因可以作為基因表達載體上的標記基因，其作用是           。獲得的轉基因克隆豬，可以解決的醫學難題是，可以避免                        。

（4）目前科學家們通過蛋白質工程制造出了藍色熒光蛋白，黃色熒光蛋白等，采用蛋白質工程技術制造出藍色熒光蛋白過程的正確順序是：            （用數字表示）。

①推測藍色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸

②藍色熒光蛋白的功能分析和結構設計序列

③藍色熒光蛋白基因的修飾（合成）

④表達出藍色熒光蛋白。

 

Answer 1

【答案】

（1）可以連接       因為由兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端是相同的（或是可以互補的）

（2）顯微注射技術

（3）為了鑒定受體細胞中是否含有目的基因       發生免疫排斥反應

（4）②①③④

 【解析】（1）因為由兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端是相同的（或是可以互補的），所以不同限制酶切割形成的黏性末端可以連接起來。

（2）將目的基因導入動物細胞的方法是顯微注射法。

（3）GFP基因作為標記基因的作用是為了鑒定受體細胞中是否含有目的基因。轉基因克隆豬可避免發生免疫排斥反應。

（4）蛋白質工程技術的操作順序是②①③④。