Question

【題目】閱讀以下材料回答下列小題

乙型腦炎病毒（JEV）是一種RNA病毒，病毒的E蛋白參與病毒復(fù)制過(guò)程。研究人員利用 基因重組的方法構(gòu)建了二種新型JEV疫苗：DNA疫苗和E蛋白疫苗。圖示主要流程。

【1】研究發(fā)現(xiàn)：受體細(xì)胞為大腸桿菌或酵母菌時(shí)，所形成的E蛋白結(jié)構(gòu)不完全相同，最可能的原因是：（ ）

A.兩種受體細(xì)胞在基因表達(dá)時(shí)所使用的密碼子不同

B.大腸桿菌無(wú)細(xì)胞核，酵母菌有細(xì)胞核可進(jìn)行基因轉(zhuǎn)錄

C.大腸桿菌無(wú)膜結(jié)構(gòu)的細(xì)胞器，無(wú)法對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)一步加工

D.兩種受體細(xì)胞在基因表達(dá)時(shí)所遵循的堿基互補(bǔ)配對(duì)原則不同

【2】①代表什么過(guò)程，②所需要的酶是 （ ）

A.轉(zhuǎn)錄 DNA聚合酶與DNA連接酶

B.逆轉(zhuǎn)錄 逆轉(zhuǎn)錄酶與RNA聚合酶

C.翻譯 DNA聚合酶與RNA聚合酶

D.逆轉(zhuǎn)錄 限制酶與DNA連接酶

【3】如圖表示N質(zhì)粒和成功導(dǎo)入E蛋白基因的質(zhì)粒EN。為篩選含EN的菌落，可用含不同抗生素：氨芐青霉素和四環(huán)素的平板培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，現(xiàn)得到A、B、C三類菌落，生長(zhǎng)情況如表。（“+”代表生長(zhǎng)，“-”代表不生長(zhǎng)）據(jù)圖和表分析，不能得出的結(jié)論是（ ）

平 板 菌 落	A	B	C
無(wú)抗生素	+	+	+
氨芐青霉素	+	+	-
四環(huán)素	+	-	-
氨芐青霉素+四環(huán)素	+	-	-

A.A菌落細(xì)胞被導(dǎo)入了N質(zhì)粒B.兩種抗生素均能抑制E蛋白表達(dá)

C.C菌落細(xì)胞未被導(dǎo)入任何質(zhì)粒D.B菌落細(xì)胞被導(dǎo)入EN質(zhì)粒

Answer 1

【答案】

【1】C

【2】D

【3】B

【解析】

基因表達(dá)載體的基本結(jié)構(gòu)包括復(fù)制原點(diǎn)、目的基因、標(biāo)記基因、啟動(dòng)子、終止子等。根據(jù)題干信息和圖形分析，N是載體質(zhì)粒，其含有的氨芐青霉素抗性基因（ampr）和四環(huán)素抗性基因（tetr）都屬于標(biāo)記基因，可以用檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞；EcoRV酶為限制酶，其切割質(zhì)粒后會(huì)破壞了四環(huán)素抗性基因（tetr）。

【1】A、自然界所有生物共有一套密碼子，A錯(cuò)誤；

B、大腸桿菌和酵母菌都可進(jìn)行基因轉(zhuǎn)錄，B錯(cuò)誤；

C、大腸桿菌屬于原核生物，酵母菌屬于真核生物，由于大腸桿菌沒(méi)有膜結(jié)構(gòu)的細(xì)胞器，無(wú)法對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)一步加工，故當(dāng)受體細(xì)胞為大腸桿菌或酵母菌時(shí)，所形成的E蛋白結(jié)構(gòu)不完全相同，C正確；

D、兩種受體細(xì)胞在基因表達(dá)時(shí)所遵循的堿基互補(bǔ)配對(duì)原則相同，D錯(cuò)誤。

故選C。

【2】乙型腦炎病毒RNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄可得①cDNA；將E蛋白基因和N質(zhì)粒連接需用②限制酶和DNA連接酶，故選D。

【3】根據(jù)表格分析，A類菌落在氨芐青霉素和四環(huán)素的培養(yǎng)基中都能夠生長(zhǎng)，說(shuō)明其導(dǎo)入的是N；B類菌落在氨芐青霉素的培養(yǎng)基中能生長(zhǎng)，說(shuō)明B菌落細(xì)胞被導(dǎo)入 EN 質(zhì)粒；C類菌落在任何抗生素的培養(yǎng)基中都不能生長(zhǎng)，說(shuō)明其沒(méi)有導(dǎo)入任何質(zhì)粒，兩種質(zhì)粒中含有氨芐青霉素抗性基因（ampr）和四環(huán)素抗性基因（tetr），能表達(dá)產(chǎn)生相應(yīng)的抗生素，但E蛋白基因的表達(dá)與兩種抗生素?zé)o關(guān)，因此ACD都能推出，B符合題意，故選B。

解答本題的關(guān)鍵是識(shí)記并理解基因工程的四個(gè)基本步驟，尤其是對(duì)核心步驟-構(gòu)建基因表達(dá)載體步驟的理解，明確基因表達(dá)載體的幾個(gè)必須的成分及其作用，進(jìn)而結(jié)合題干要求分析答題。