Question

【題目】[生物——選修3:現代生物科技專題]Bt基因即是蘇云金芽胞桿菌（Badcillus thuringiensis，簡稱Bt)基因，因其表達產物Bt毒蛋白殺蟲效果好、安全、高效等優點而成為應用最為廣泛的轉殺蟲基因。下圖為培育轉Bt基因苗的基本操作過程。

(1)Bt基因可從構建的Bt基因組文庫中獲取，也可以從其cDNA文庫中獲取，從前者獲取的基因______(填“含有”或“不含有”)啟動子。若利用PCR技術從cDNA文庫中獲取Bt基因（基因序列未知），需根據Bt蛋白氨基酸序列設計引物，引物的序列可以有多種，原因是_____________.在PCR體系中需加入其中的____(填“全部”或“任意1種”或“其中2種”)引物，若Bt基因序列已知，則引物的序列通常為_____種。

(2)在構建基因表達載體的過程中，為了方便篩選含有目的基因的細胞，作為運載體的Ti質粒應含有_____基因，其中________是驅動基因轉錄的酶識別和結合的位點，而能幫助目的基因整合到宿主細胞染色體上的序列稱為____________。圖示將目的基因導入受體細胞的方法是_________________。

(3)步驟Ⅳ中產生的細胞團稱為____________,步驟Ⅳ和Ⅴ過程要注意控制培養基中___________的濃度比例，以便獲得幼苗。

Answer 1

【答案】 含有 一種氨基酸可能有多種密碼子，對應生物DNA堿基序列就會有多種 全部 2 標記基因（抗性基因） 啟動子 T-DNA（可轉移DNA） 農桿菌轉化法 愈傷組織 生長素與細胞分裂素

【解析】試題分析：本題圖文結合的形式綜合考查學生對基因工程及其應用的掌握情況。梳理基因工程的基本操作步驟、植物組織培養的過程，通過提取圖中的信息并結合題意進行相關試題的解答。

(1) 基因組文庫是指含有某種生物全部基因隨機片段的重組DNA克隆群體，因此從基因組文庫中獲取的Bt基因含有啟動子。根據Bt蛋白氨基酸序列設計引物，需先依據Bt蛋白的氨基酸序列→推測相應的mRNA的堿基序列→進而推測出Bt基因的堿基序列，再依據Bt基因的堿基序列設計引物。由于一種氨基酸可能有多種密碼子，對應生物DNA堿基序列就會有多種， 所以根據Bt蛋白氨基酸序列設計的引物序列可以有多種。由于從cDNA文庫中獲取的Bt基因序列未知，因此在PCR體系中需加入其中的全部引物；若Bt基因序列已知，則引物的序列通常為2 種。

(2) 在構建基因表達載體的過程中，為了方便篩選含有目的基因的細胞，作為運載體的Ti質粒應含有標記基因（抗性基因）基因。啟動子是RNA聚合酶識別和結合的位點。Ti質粒中的T-DNA（可轉移DNA）能幫助目的基因整合到宿主細胞染色體上。圖示將目的基因導入受體細胞的方法是農桿菌轉化法。

(3) 步驟Ⅳ中經過脫分化產生的細胞團稱為愈傷組織，步驟Ⅳ至Ⅴ過程為再分化，要注意控制培養基中生長素與細胞分裂素的濃度比例，以便獲得幼苗。