Question

【題目】【生物——選修1：生物技術實踐】

下圖為銀川環保部門對艾依河段的大腸桿菌進行檢測的操作和配方圖。據圖回答下列相關問題：

（1）圖甲中濾膜的孔徑應__________（填“大于”或“小于”）大腸桿菌。

（2）配制圖乙中的基礎培養基時，除了水分、無機鹽和瓊脂以外，還應加入__________。待各成分都熔化后,調整pH和滅菌，待冷卻至50℃左右時，在酒精燈火焰附近___________。大腸桿菌在伊紅美藍培養基上生長呈黑色菌落，從功能上劃分，該培養基屬于_________培養基。

（3）用平板劃線法分離樣液中的大腸桿菌，操作時，接種環通過灼燒滅菌，在第二次及以后劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線的目的是_________。

（4）要檢測樣液中的大腸桿菌含量，取1ml河水樣本，加入4ml無菌水，充分混勻后，在3個平板上用涂布平板法分別接入0.1ml樣液，在37℃的培養箱中放置48小時，3個平板上的黑色菌落數分別為51、50、49。據此可得出1ml河水樣本中活菌數為______個。

（5）該小組通過統計菌落的數目，計算出單位體積樣品中大腸桿菌數目，理論上他們的統計值比實際值_______（偏高/偏低），理由是_______________。

Answer 1

【答案】 小于 氮源（蛋白胨） 倒平板 鑒別（鑒定） 將聚集的菌體逐步稀釋，以便獲得單個菌落 2.5×103（或2500） 偏低 兩個或多個大腸桿菌連在一起時，平板上只能觀察到1個菌落

【解析】【試題分析】

1．對不耐高溫的試劑，可以用濾膜過濾除菌。圖甲中為了在濾膜上獲得大腸桿菌，濾膜的孔徑應小于大腸桿菌。

2．作為基礎培養基，其營養成分應能滿足微生物生長的需要，都應含有水、無機鹽、碳源（提供碳元素的物質）和氮源（提供氮元素的物質）等。

3.鑒別培養基是根據微生物的代謝特點，在培養基中加入某種指示劑或化學藥品配制而成的，用以鑒別不同種類的微生物。例如，在培養基中加入伊紅和美藍，可以用來鑒別大腸桿菌等細菌。

4.每mL樣品中的菌落數＝(C÷V) ×M，其中，C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積(mL)，M代表稀釋倍數。

（1）圖甲中濾膜的孔徑應小于大腸桿菌，濾膜過濾才能獲得大腸桿菌。

（2）培養基應該滿足微生物生長需要，因此配制圖乙中的基礎培養基時除了水分、無機鹽和瓊脂以外，還應加入氮源；待各成分都熔化后,調整pH和滅菌，待冷卻至50℃左右時，在酒精燈火焰附近倒平板；大腸桿菌在伊紅美藍培養基上生長呈黑色菌落，從功能上劃分，該培養基屬于鑒別（鑒定）培養基。

（3）用平板劃線法分離樣液中的大腸桿菌的操作中，為了將聚集的菌體逐步稀釋，以便獲得單個菌落，需要在第二次及以后劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線。

（4）根據題意可知，涂布平板時所用的稀釋液的稀釋倍數M＝5，3個平板上的黑色菌落平均數C＝(51＋50＋49) ÷3＝50，涂布平板時所用的稀釋液的體積V＝0.1mL。根據公式可知，1ml河水樣本中活菌數＝(C÷V)×M＝(50÷0.1)×5＝2.5×103（或2500）個。

（5）若兩個或多個大腸桿菌連在一起時，平板上只能觀察到1個菌落，因此理論上該小組的統計值比實際值偏低。