Question

【題目】已知某傳染性疾病的病原體為RNA病毒，該病毒表面的A蛋白為主要抗原，制備抗A蛋白抗體的部分流程如下圖．
請回答：
（1）①代表的是過程．為獲得A基因表達載體，需用酶對A基因和運載體進行切割．將A基因表達載體導入動物細胞常用的方法是 ．
（2）利用PCR技術擴增A基因時，設計引物序列的主要依據是 ， 加入引物的作用是 ．
（3）與體內DNA復制相比較，PCR反應要在一定的緩沖溶液中才能進行，并且要嚴格控制等條件．
（4）過程③采用的技術是 ， 獲得的X叫細胞．

Answer 1

【答案】
（1）逆轉錄；限制；顯微注射法
（2）A基因兩端的部分核苷酸序列；與A基因單鏈相應互補序列結合，然后再DNA聚合酶作用下進行延伸
（3）溫度
（4）動物細胞融合；雜交瘤
【解析】解：（1）由以上分可知①是逆轉錄過程．構建基因表達載體時，首先需要用同種限制酶切割含有目的基因的外源DNA和運載體，其次需要用DNA連接酶將目的基因與運載體連接形成重組DNA．將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法．（2）利用PCR技術擴增A基因時，根據A基因兩端的部分核苷酸序列設計引物序列，加入引物的作用是與A基因單鏈相應互補序列結合，然后再DNA聚合酶作用下進行延伸．（3）PCR擴增目的基因的過程：①高溫變性：DNA解旋過程（PCR擴增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動解開）；低溫復性：引物結合到互補鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈．因此，與體內DNA復制相比較，PCR反應要在一定的緩沖溶液中才能進行，并且要嚴格控制溫度等條件．（4）③過程需要采用動物細胞融合技術，根據圖中信息可知X為雜交瘤細胞． 故答案為：（1）逆轉錄 限制 顯微注射法（2）A基因兩端的部分核苷酸序列 與A基因單鏈相應互補序列結合，然后再DNA聚合酶作用下進行延伸（3）溫度（4）動物細胞融合 雜交瘤
分析題圖：圖示為疫苗生產和抗體制備的流程之一，其中①表示逆轉錄過程；②是獲取目的基因（A基因）的過程；③是細胞融合過程；X為雜交瘤細胞．