Question

【題目】科學家研究發現絨山羊的羊絨質量與毛角蛋白Ⅱ型中間絲（KIFⅡ）基因密切相關，獲得轉KIFⅡ基因的高絨質絨山羊的簡單流程如圖1所示．圖2表示KIFⅡ基因與pZHZ1質粒構建重組質粒的過程，A，B，C，D為四種識別切割序列完全不同的限制酶的酶切位點．已知質粒pZHZ1的長度為3.7kb（1kb=1000對堿基），其中A～B區域長度為0.8kb，B～C區域長度為0.2kb，C～D區域長度為0.5kb．請回答下列問題：
（1）圖1中構建的重組表達載體，目的基因的上游應有 ， 驅動基因的轉錄．
（2）在圖1過程③中，用激素處理以獲取更多的卵（母）細胞，這些卵（母）細胞需在體外培養到期，方可進行過程④的操作．
（3）圖1中過程④采用的生物技術是 ， 得到的重組細胞發育為早期胚胎后，可通過技術獲得較多胚胎．
（4）現分別用限制酶A，D切割圖2中重組質粒pZHZ2樣品，結果被酶A切割成1.7kb和3.4kb兩個片段，被酶D切割成1.9kb和3.2kb兩個片段．據此判斷KIFⅡ基因大小為 ， 并請將目的基因內部的酶D切割位點用相應的字母（D）標注在圖3中．

Answer 1

【答案】
（1）啟動子
（2）促性腺；減數第二次分裂中期
（3）細胞核移植；胚胎分割
（4）1.6 kb；
【解析】解：（1）圖1中構建的重組表達載體，其組成包括目的基因、啟動子、終止子、標記基因，其中目的基因的上游應有啟動子，它是RNA聚合酶識別和結合的部位，驅動基因的轉錄．（2）用促性腺激素可對動物進行超數排卵處理．卵母細胞需在體外培養到減數第二次分裂中期才成熟．（3）圖1中④過程采用了細胞核移植技術；來自同一個胚胎的后代具有相同的遺傳物質，在胚胎移植時，可通過胚胎分割技術獲得更多的胚胎．（4）已知質粒pZHZ1的長度為3.7kb，其中BC區域長度為0.2kb，所以切去BC段后的質粒長度為3.7﹣0.2=3.5kb．現用限制酶A、D切割重組質粒pZHZ2樣品，結果被酶A切割成1.7kb和3.4kb兩個片段，可知重組質粒pZHZ2的總長度為1.7+3.4=5.1kb，所以KIFⅡ基因長度為5.1﹣3.5=1.6kb．重組質粒中A的切割位點距B的切割位點0.8kb，單獨用限制酶A切割后產生1.7kb和3.4kb兩個片段，說明在重組質粒中除了圖中標示出來的A酶識別位點外，還有一個A酶識別位點；D酶的酶切位點距C0.5kb，用D單獨酶切后產生1.9kb和3.2kb兩個片段，說明在重組質粒中含有一個D的酶切位點，根據題中信息提示“目的基因內部的酶D切割位點用相應的字母（D）標注在圖3中”，可確定在BC之間含有D的一個識別位點，D的識別位點在距B右側0.2kb處，距A右側1.0kb處，如下圖所示： ．
【考點精析】本題主要考查了基因工程的原理及技術的相關知識點，需要掌握基因工程的原理是利用DNA重組技術才能正確解答此題．