Question

【題目】某化工廠的污水池中含有一種有害的難以降解的有機化合物A。研究人員用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基，成功篩選到能高效降解化合物A的細菌（目的菌）。實驗的主要步驟如下圖所示。請分析回答下列問題。

（1）培養(yǎng)基中加入化合物A的目的是_________________________________________，這種培養(yǎng)基屬于_____________培養(yǎng)基。

（2）“目的菌”生長所需的氮源和碳源是來自培養(yǎng)基中的___________________________。實驗需要振蕩，培養(yǎng)，由此推測“目的菌”的代謝類型是_______________________。

（3）在上述實驗操作過程中，獲得純凈“目的菌”的關(guān)鍵是_______________________________。

（4）某同學計劃統(tǒng)計污水池中“目的菌”的總數(shù)，他選用10-4、10-5、10-6稀釋液進行平板劃線，每種稀釋液都設(shè)置了3個培養(yǎng)皿。從設(shè)計實驗的角度看，還應(yīng)設(shè)置的一組對照實驗是__________________________，此對照實驗的目的是__________________________________________。

（5）有同學將“目的菌”破碎并提取得到該菌蛋白質(zhì)，之后一同學利用瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)將得到的蛋白質(zhì)進行分離，在電泳過程中，影響蛋白質(zhì)遷移速度的因素包括蛋白質(zhì)分子的________________、_______________以及分子的形狀等。而另一位同學則利用凝膠過濾法分離蛋白質(zhì)（下圖），他在操作中加樣的正確順序是___________________。待蛋白質(zhì)接近色柱底端時，用試管連續(xù)收集流出液。先收集到的蛋白質(zhì)與后收集到的蛋白質(zhì)的區(qū)別是______________________________________。

Answer 1

【答案】提供特殊的碳源和氮源，篩選目的菌 選擇 化合物A 異養(yǎng)需氧型 防止外來雜菌入侵 不接種的空白培養(yǎng)基 判斷培養(yǎng)基是否被雜菌污染 帶電性質(zhì)和多少 分子大小 ④①②③ 先收集到的蛋白質(zhì)分子量小，后收集到的分子量大

【解析】

培養(yǎng)基的主要成分：碳源、氮源、水、無機鹽、生長因子等。

培養(yǎng)基按功能用途分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。

消毒指使用較為溫和的物理或化學方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物（不包括芽孢和孢子）；滅菌指使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。

分離蛋白質(zhì)常用凝膠色譜法，根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的有效方法。

（1）培養(yǎng)基中含化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素，化合物A中可以提供碳源、氮源，只有能篩選高效降解化合物A的目的菌才可以在該培養(yǎng)基上生存，可以篩選目的菌。該培養(yǎng)基以化合物A為唯一碳源、氮源，屬于選擇培養(yǎng)基。

（2）化合物A 可以為“目的菌”生長提供所需的氮源和碳源。實驗需要振蕩培養(yǎng)，另外目的菌利用有機物A，說明該目的菌屬于異養(yǎng)需氧生物。

（3）在上述實驗操作過程中，獲得純凈“目的菌”的關(guān)鍵是防止外來雜菌入侵，需要做好消毒和滅菌處理。

（4）統(tǒng)計污水池中“目的菌”的總數(shù)時，為了判斷培養(yǎng)基是否被雜菌污染，需要用不接種的空白培養(yǎng)基作為對照，看該培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生。

（5）一同學在電泳分離蛋白質(zhì)的過程中，影響蛋白質(zhì)遷移速度的因素包括蛋白質(zhì)分子的帶電性質(zhì)和多少、分子大小以及分子的形狀等。而另一位同學則利用凝膠過濾法分離蛋白質(zhì)，首先用吸管將透析后的樣品沿管壁加到色譜柱的頂端；加樣后，打開下端出口，使樣品滲入凝膠床內(nèi)。等樣品完全進入凝膠層后，關(guān)閉下端出口。隨后再加入磷酸緩沖液，連接洗脫瓶進行洗脫。加樣的具體順序為：④①②③。待蛋白質(zhì)接近色柱底端時，用試管連續(xù)收集流出液。先收集到的蛋白質(zhì)分子量小，后收集到的分子量大。