Question

【題目】如圖為某種質粒的簡圖，小箭頭所指分別為限制性核酸內切酶EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位點，P為轉錄的啟動部位。已知目的基因的兩端有EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位點，受體細胞為無任何抗藥性的原核細胞。下列有關敘述正確的是(　　)

A. 將含有目的基因的DNA與質粒分別用EcoRⅠ酶切，在DNA連接酶作用下，生成由兩個DNA片段之間連接形成的產物有兩種

B. DNA連接酶的作用是將酶切后得到的黏性末端連接起來形成一個重組質粒，該過程形成兩個磷酸二酯鍵

C. 為了防止目的基因反向粘連和質粒自身環化，酶切時可選用的酶是EcoRⅠ和BamHⅠ

D. 能在含青霉素的培養基中生長的受體細胞表明該目的基因已成功導入該細胞

Answer 1

【答案】C

【解析】本題結合圖形考查基因表達載體的構建，要求考生理解構建基因表達載體的方法，明確構建的基因表達載體應含有哪些部件及這些部件的功能，此題難度稍大。

根據題意，目的基因的兩端有EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位點，將含有目的基因的DNA與用EcoRⅠ酶切，會得到含目的基因的DNA片段和不含目的基因的DNA片段；根據質粒的簡圖可知，將質粒用EcoRⅠ酶切，會得到與質粒周長等長的鏈狀DNA；因此將含有目的基因的DNA與質粒分別用EcoRⅠ酶切，在DNA連接酶作用下，可生成含目的基因的原DNA片段兩個之間進行連接、由含目的基因的DNA片段與質粒周長等長的鏈狀DNA相互連接形成的鏈狀DNA、二倍于原質粒周長的環狀DNA三種類型，A錯誤；DNA連接酶的作用是將酶切后得到的黏性末端連接起來形成一個重組質粒，該過程形成四個磷酸二酯鍵，B錯誤；EcoRⅠ和BamHⅠ的識別序列不同，獲取目的基因和切割質粒時，同時選用EcoRⅠ和BamHⅠ切割，目的基因兩端形成的末端不同，切割開的質粒兩端形成的末端不同，再用DNA連接酶連接，可以防止目的基因反向粘連和質粒自身環化，C正確；題圖顯示，在構建基因表達載體的過程中質粒中的青霉素抗性基因和四環素抗性基因都不會被破壞，因此能在含青霉素和四環素的培養基中生長的受體細胞不能表明目的基因已成功導入該細胞，D錯誤。