Question

【題目】回答有關現代生物技術的問題

乙肝是由乙型肝炎病毒（HBV）引起的一種慢性傳染病，主要采用基因工程乙肝疫苗進行防治。科研人員采用轉基因技術將乙肝病毒表面抗原（HBsAg）基因片段導入酵母細胞或中國倉鼠卵巢細胞（CHO），讓重組后的酵母或CHO細胞在體外培養過程中產生HBsAg，將其分離、提純之后制成乙肝疫苗，部分生產過程如圖。

（1）下列①～④表示獲得重組CHO細胞的步驟，其中步驟④是______；①-④步驟的正確排序是______。

①重組DNA分子導入CHO細胞

②篩選成功導入HBsAg基因的CHO細胞

③人工合成HBsAg基因

④______

（2）大量培養重組酵母和重組CHO細胞生產乙肝疫苗過程中，需將培養液中HBsAg與其他雜質分離，可采用的方法是______（多選）。

A．破碎細胞 B．加入硫酸銨 C．改變pH D．冷凍干燥

（3）利用重組酵母和重組CHO細胞生產乙肝疫苗，分別屬于生物工程中的______、______領域。

（4）利用重組CHO細胞和重組酵母生產基因工程乙肝疫苗，目前都在進行規模化生產，但兩種方法各有不足和優勢。請在下列選項中選擇合適的編號填入表對應的空格中，以表示你對此問題的分析（編號可重復選用）：

①結構簡單、遺傳操作較為容易

②表達的HBsAg更接近天然形式，疫苗穩定性好

③表達的HBsAg與天然形式存在差異

④培養條件要求高，生產成本較高

⑤可將HBsAg分泌到胞外，易于分離提純

⑥易于培養、繁殖迅速，生產成本較低

	利用重組酵母細胞 生產乙肝疫苗	利用重組CHO細胞 生產乙肝疫苗
優勢	______	______
不足	______	______

Answer 1

【答案】HBsAg基因與運載體的連接 ③④①② HBsAg基因與運載體的連接 BC 發酵工程 細胞工程 ①⑤⑥ ②⑤ ③ ④

【解析】

基因工程的基本步驟包括目的基因的獲取、構建基因表達載體（核心步驟）、將目的基因導入受體細胞、目的基因的檢測與鑒定。據圖分析，圖示是利用基因工程技術將目的基因（HBsAg）分別導入酵母菌細胞和動物細胞（倉鼠卵巢細胞），讓微生物細胞或動物細胞生產HBsAg的過程；將目的基因導入微生物細胞常用鈣離子處理使其成為感受態細胞，以便目的基因的導入；將目的基因導入動物細胞常用顯微注射法。

（1）根據以上分析已知，基因工程技術的基本步驟是：目的基因的獲取、基因表達載體的構建、將目的基因導入受體細胞、目的基因的檢測與鑒定，因此步驟④是HBsAg基因與運載體的連接，且題中四個步驟的正確順序是③④①②。

（2）大量培養重組酵母和重組CHO細胞生產乙肝疫苗過程中，需將培養液中HBsAg與其他雜質分離，可采用的方法是加入硫酸銨或改變pH，故選BC。

（3）利用重組酵母生產乙肝疫苗，利用了生物工程中的發酵工程技術，利用重組CHO細胞生產乙肝疫苗，利用了動物細胞工程中的動物細胞培養技術。

（4）利用重組酵母細胞生產乙肝疫苗的優勢在于①結構簡單、遺傳操作較為容易；⑤可將HBsAg分泌到胞外，易于分離提純；⑥易于培養、繁殖迅速，生產成本較低，而不足在于③表達的HBsAg與天然形式存在差異。利用重組CHO細胞生產乙肝疫苗的優點在于②表達的HBsAg更接近天然形式，疫苗穩定性好；⑤可將HBsAg分泌到胞外，易于分離提純，但是缺點在于④培養條件要求高，生產成本較高。