Question

【題目】人心肌細胞中的肌鈣蛋白由三個結構不同的亞基組成，即肌鈣蛋白T（cTnT）、肌鈣蛋白I（cTnI）和 肌鈣蛋白C（cTnC），其中肌鈣蛋白I（cTnI）在血液中含量上升是心肌損傷的特異指標。為制備抗cTnI的單克隆抗體，科研人員完成了以下過程。

（1）細胞培養中，為防止有害代謝物的積累，可采用_________________的方法。每隔2周用cTnI作為抗原注射小鼠一次，共注射三次，其目的是_________________，最后一次免疫后第3天，取脾臟內部分組織制成細胞懸液與骨髓瘤細胞誘導融合，常用的誘導因素是__________。

（2）甲、乙、丙中，只含雜交瘤細胞的是____________，②過程表示將乙細胞接種到多孔培養板上，進行抗體陽性檢測，之后稀釋、培養、再檢測，并多次重復上述操作，其目的是篩選獲得能產生___________________的抗cTnI抗體的雜交瘤細胞。

（3）酶聯免疫吸附雙抗體夾心法是醫學上常用的定量檢測抗原的方法，具體原理如下圖：

據圖分析，固相抗體和酶標抗體均能與抗原結合，這是由于不同抗體與同一抗原表面的_________結合。該檢測方法中，酶標抗體的作用是__________________，可通過測定產物量來判斷待測抗原量。

（4）研究人員獲得三種抗cTnI單克隆抗體，分別記為A、B、C。為檢測哪兩種單克隆抗體適合用于雙抗體夾心法，科研人員需要進行_________組實驗。

Answer 1

【答案】 定期更換培養液 加強免疫，刺激小鼠機體產生更多的淋巴細胞 滅活的病毒（PEG） 乙和丙 特異性強、靈敏度高 不同部位 與待測抗原結合，酶催化檢測底物反應 6

【解析】【試題分析】

本題以制備抗cTnI的單克隆抗體為載體，結合圖解，考查制備單克隆抗體的相關知識，第（3）小題又設置了新的情境，考查考生的實驗分析能力和識圖能力，以及獲取信息的能力。解答本題需要考生熟知制備單克隆抗體的流程、原理和單克隆抗體的優點，結合題意梳理回顧所學知識，對各小題進行解答。最后兩道小題考生要根據從題圖中獲取的信息，再結合所學知識進行答題。

（1）細胞培養中，為防止有害代謝物的積累對自身造成危害，可采用定期更換培養液的方法，以便清除代謝產物。每隔2周用cTnI作為抗原注射小鼠一次，共注射三次，其目的是加強免疫，刺激小鼠機體產生更多的淋巴細胞；誘導動物細胞融合常用的誘導因素是滅活的病毒（PEG）。

（2）圖中①②依次表示單克隆抗體制備過程中的兩次篩選，其中①第一次是用選擇培養基篩選出雜交瘤細胞，②第二次是通過克隆化培養和抗體檢測篩選出能產生抗cTnI抗體的雜交瘤細胞。因此，甲、乙、丙中，只含雜交瘤細胞的是乙和丙；②過程目的是篩選獲得能產生特異性強、靈敏度高的抗cTnI抗體的雜交瘤細胞。

（3）據圖分析，固相抗體和酶標抗體均能與抗原結合，這是由于不同抗體與同一抗原表面的不同部位結合。該檢測方法中，酶標抗體的作用是與待測抗原結合，酶催化檢測底物反應，可通過測定產物量來判斷待測抗原量。

（4）根據題意，為檢測A、B、C中哪兩種單克隆抗體適合用于雙抗體夾心法，科研人員需要進行6組實驗，檢測并比較各組實驗的產物量。