Question

【題目】物質W是一種含氮有機物，會污染土壤。 W在培養基中達到一定量時培養基表現為不透明。某研究小組欲從土壤中篩選出能降解W的細菌（目標菌）。回答下列問題。

（1）在細菌培養時，培養基中能同時提供碳源、氮源的成分是______________（填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”）。要從土壤中分離目標菌，所用選擇培養基中的氮源應該是_________。

（2）在從土壤中分離目標菌的過程中，發現培養基上甲、乙兩種細菌都能生長并形成菌落（如下圖所示）。如果要得到目標菌，應該選擇________菌落進一步純化，選擇的依據是_________________________。

（3）對得到的目標菌純化培養過程中，用稀釋涂布平板法進行活菌計數，其計數結果比起真實值偏_____（填“高”，“低”），原因是____________________。

（4）實驗過程中用到的各種器具，材料等都需要消毒或滅菌，其中培養基需要用____________方法滅菌，接種環的滅菌方法是 ____________。

（5）篩選得到的菌種進行保藏，頻繁使用可用___________培養基4℃保藏，若長期保存，可以采用與甘油混勻，-20℃冰箱保藏的方法。

Answer 1

【答案】蛋白胨 W 乙 乙菌落周圍出現透明圈，說明乙菌能降解W 低 當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落 高壓蒸汽滅菌 灼燒滅菌 固體斜面（培養基）

【解析】

常用的滅菌方法：干熱滅菌法、灼燒滅菌法、高壓蒸汽滅菌法。

對于頻繁使用的菌種，常用臨時保藏法；對于需要長期保存的菌種，常用甘油管藏法。

（1）在細菌培養時，培養基中的蛋白胨可以為其同時提供碳源、氮源。目標菌是能降解W的細菌，故應該選擇以W為唯一氮源的培養基分離目標菌。

（2）乙菌落周圍出現透明圈，說明乙菌能降解W，故要得到目標菌，應該選擇W菌落進一步純化。

（3）當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，故用稀釋涂布平板法進行活菌計數，其計數結果比起真實值偏低。

（4）培養基常用高壓蒸汽滅菌法滅菌，接種環常用灼燒滅菌。

（5）對頻繁使用的菌種，常用固體斜面培養基4℃保藏，若長期保存，可以采用與甘油混勻，-20℃冰箱保藏的方法。