Question

【題目】某質粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三種限制酶切割位點，同時還含有抗四環素基因和抗氨芐青霉素基因。利用此質粒獲得轉基因抗鹽煙草的過程如圖所示，請回答下列問題。

（1）將抗鹽基因導入煙草細胞內，使煙草植株產生抗鹽性狀，這種新性狀（變異性狀）的來源屬于________。

（2）如果將抗鹽基因直接導入煙草細胞，一般情況下，煙草不會具有抗鹽特性，原因是抗鹽基因在煙草細胞中不能________，也不能________。

（3）在構建重組質粒時，應選用________和________兩種酶對_______和____ 進行切割，以保證重組DNA序列的唯一性。

（4）將轉入抗鹽基因的煙草細胞培育成完整的植株需要用 技術，經過____ 和 進而形成完整植株，此過程除營養物質外還必須向培養基中添加_____ _ 。

（5）為了確定抗鹽煙草是否培育成功，既要用放射性同位素標記的________作探針進行分子雜交檢測，又要用 的方法從個體水平鑒定煙草植株的耐鹽性。

Answer 1

【答案】（1）基因重組

（2）復制 表達（合成抗鹽基因的mRNA）

（3）SalⅠ HindⅢ 質粒 含抗鹽基因的DNA

（4）植物組織培養 脫分化 再分化 植物激素（生長素和細胞分裂素）

（5）抗鹽基因 一定濃度的鹽水澆灌煙草植株（將煙草植株移栽到鹽堿地中）

【解析】

試題分析：（1）轉基因技術原理為基因重組。

（2）目的基因要通過運載體導入，才能在受體細胞穩定保存和復制、表達。

（3）構建重組質粒時，用SalⅠ、HindⅢ切割剛好切下目的基因，而BamHⅠ切割會破壞目的基因，用SalⅠ、HindⅢ切割質粒，保證質粒各有一個粘性末端和目的基因相同，以保證重組DNA序列的唯一性。

（4）將離體細胞培養成植株需要植物組織培養技術。該細胞經過脫分化形成愈傷組織，愈傷組織再分化生成幼苗。在組織培養除了營養物質，還需要細胞分裂素和生長素。

（5）可以用放射性同位素標記目的基因的一條單鏈，作為DNA探針，進行分子雜交檢測目的基因是否成功整合到是體細胞染色體DNA。又要在個體水平進行抗鹽性檢測實驗，檢測目的基因是否成功表達。