Question

【題目】以下是生物學技術制備抗體的兩個途徑模式簡圖。

（1）上圖中過程①的完成采用的方法有:_____________，依據的生物學原理_____________。

（2）過程④要用到的酶有_____________，過程⑥采用的方法叫_____________。

上圖中的質粒本身含有氨芐青霉素抗性基因和M、N兩種限制酶（兩種酶切割序列完全不同）切割位點。若用限制酶M和N切割，通過凝膠電泳分離，分析得到下表。

分子量(kb)	1.0	2.0	3.0	4.0	5.0	6.0	7.0	8.0	9.0	10.0
酶M	+				+					+
酶N							+		+
酶M+酶N	+	+	+		+
凝膠電泳結果（1kb=1000對堿基，+表示檢測到該片段的存在）

（3）該質粒長度為___________kb，在該質粒中，M酶與N酶的切割點分別有__________、_______個。

（4）氨芐青霉素抗性基因的作用是_______________________________________。

Answer 1

【答案】 用物理方法（離心、振動、電刺激）、聚乙二醇（PEG）、滅活的病毒 細胞膜具有流動性 逆轉錄酶、DNA聚合酶 感受態法 16 3 2 作為標記基因（鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將有目的基因的受體細胞篩選出來）

【解析】試題分析：本題以“制備抗體的兩個途徑模式簡圖”為情境，綜合考查學生對基因工程、生產單克隆抗體等相關知識的識記和理解能力。以圖示中的箭頭和文字信息為切入點，圍繞基因工程操作的基本程序、生產單克隆抗體的過程明辨圖中數字所示的生理過程、字母所示的細胞名稱。在此基礎上，結合問題情境，從題圖中提取有效信息進行相關問題的解答。

(1) 過程①是誘導動物細胞融合，采用的方法有:用物理方法（離心、振動、電刺激）、聚乙二醇（PEG）、滅活的病毒，依據的生物學原理是細胞膜具有流動性。

(2) 過程④為逆轉錄，要用到的酶有逆轉錄酶、DNA聚合酶。過程⑥為將構建的重組質粒導入大腸桿菌細胞內，最常用的轉化方法是用CaCl2或Ca2+處理，增大細胞壁的通透性,使其成為感受態細胞，即采用的方法叫感受態法。

(3)上圖中的質粒為環狀DNA。表中信息顯示：單獨用限制酶M切割，得到1.0、5.0和10.0 kb的3個片段，說明有3個酶M的切割點；單獨用限制酶N切割，得到7.0和9.0 kb的2個片段，說明有2個酶N的切割點。綜上分析，該質粒長度為1.0＋5.0＋10.0＝16.0 kb。

(4) 氨芐青霉素抗性基因的作用是作為標記基因（鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將有目的基因的受體細胞篩選出來）。