Question

【題目】P53基因是正常細胞內重要的抑癌基因，研究表明P53基因突變可導致肝臟細胞癌變．科學家研究發現P53基因對體外培養的肝癌細胞生長有抑制作用，請回答下列問題：
（1）切下新鮮的肝癌組織，在37℃下用消化30﹣40分鐘，在5%培養箱中培養，培養基是模擬了人體的成分配制的，在培養基中加入一定量的抗生素，其目的是 ．
（2）獲取P53基因的方法通常包括和 ．
（3）將P53基因經過一系列的處理并與脂質體混合，將混合物滴加至肝癌細胞上，輕輕混勻．最后篩選出含有P53基因的肝癌細胞．脂質體在這個操作中的作用是 ．
（4）為證明P53基因有抑癌作用，需將兩種細胞接入多孔板中，并從次日開始檢測每孔的細胞總數，繪制成如圖所示的生長曲線．請分析兩條曲線分別是哪種細胞，曲線1是細胞，曲線2是細胞．

Answer 1

【答案】
（1）胰蛋白酶；CO2；內環境；防止雜菌污染
（2）化學方法合成；從基因文庫中獲取
（3）將P53（目的）基因導入肝癌細胞
（4）肝癌細胞；轉入P53基因的肝癌細胞
【解析】解：（1.）動物細胞培養前需要用胰蛋白酶處理組織，使細胞分散成單個細胞．動物細胞培養的條件：①無菌、無毒的環境：消毒、滅菌；添加一定量的抗生素；定期更換培養液，以清除代謝廢物．②營養物質：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質．③溫度和PH．④一定的氣體環境：95%空氣（細胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養液的PH）．
（2.）獲取目的基因（P53基因）的方法通常包括化學方法合成和從基因文庫中獲取．
（3.）脂質體在這個操作中的作用是將P53（目的）基因導入肝癌細胞．
（4.）P53基因是正常細胞內重要的抑癌基因，所導入P53基因的肝癌細胞數目下降，而普通肝癌細胞能無限增殖，其數目不斷上升，即曲線1是肝癌細胞，曲線2是轉入P53基因的肝癌細胞．
【考點精析】通過靈活運用基因工程的原理及技術和動物細胞與組織培養過程，掌握基因工程的原理是利用DNA重組技術；取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉入培養瓶中進行原代培養→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續傳代培養即可以解答此題．