Question

【題目】枯草芽孢桿菌盛產(chǎn)蛋白酶，后者在生物醫(yī)藥和日用化工等生產(chǎn)領(lǐng)域具有重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值，且已大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用．

（1）在培養(yǎng)包括枯草芽孢桿菌在內(nèi)的異養(yǎng)型微生物時(shí)，培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分應(yīng)包括水和__（用序號(hào)組合回答）。

①淀粉 ②蛋白質(zhì) ③生長(zhǎng)因子 ④葡萄糖 ⑤無機(jī)鹽

為篩選枯草芽孢桿菌的蛋白酶高產(chǎn)株，將分別浸過不同菌株（a～e）的分泌物提取液及無菌水（f） 的無菌圓紙片置于含某種高濃度蛋白質(zhì)的平板培養(yǎng)基表面；在37℃恒溫箱中放置2～3天，結(jié)果如圖1。

（2）大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化首選的菌株是__；菌株b提取物周圍沒有形成明顯清晰區(qū)的原因是__。

圖2顯示枯草芽孢桿菌的蛋白酶和其它酶的熱穩(wěn)定性數(shù)據(jù)，即酶在不同溫度下保溫足夠長(zhǎng)的時(shí)間，再在酶活性最高的溫度下測(cè)其酶活性．在該蛋白酶的工業(yè)化生產(chǎn)過程中，通常需對(duì)發(fā)酵液在60～70℃保溫一定時(shí)間，再制備酶制劑．

（3）在60～70℃保溫一定時(shí)間的作用是__。

A．誘導(dǎo)蛋白酶的熱穩(wěn)定性

B．有利于發(fā)揮蛋白酶的最佳活性

C．裂解枯草芽孢桿菌細(xì)胞

D．大幅度降低發(fā)酵液中其他酶的活性

（4）枯草芽孢桿菌蛋白酶制備的合理工藝步驟應(yīng)為__（選擇正確的序號(hào)并排序）。

①過濾 ②干燥 ③破碎 ④濃縮．

Answer 1

【答案】①②③⑤/②③④⑤ a ①不能合成蛋白酶或合成的蛋白酶量不足；②合成的蛋白酶不分泌或分泌量不足；③分泌的蛋白酶活性低 D ①④②

【解析】

微生物的營(yíng)養(yǎng)成分主要有：碳源、氮源、水和無機(jī)鹽等．大多數(shù)微生物是異養(yǎng)生物，在培養(yǎng)微生物時(shí)需要滿足其生長(zhǎng)的溫度、pH和氧氣等條件。

（1）由于淀粉和葡萄糖都屬于糖類，能提供有機(jī)碳源，所以在培養(yǎng)包括枯草芽孢桿菌在內(nèi)的異養(yǎng)型微生物時(shí)，培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分應(yīng)包括水和①淀粉、②蛋白質(zhì)、③生長(zhǎng)因子和⑤無機(jī)鹽或水和②蛋白質(zhì)、③生長(zhǎng)因子、④葡萄糖或⑤無機(jī)鹽。

（2）根據(jù)題意和圖1分析可知：a周圍的透明圈最大，說明分泌的蛋白酶最多，所以大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化首選的菌株是a．菌株b提取物周圍沒有形成明顯清晰區(qū)的原因是①不能合成蛋白酶或合成的蛋白酶量不足或②合成的蛋白酶不分泌或分泌量不足或③分泌的蛋白酶活性低。

（3）根據(jù)題意和圖2分析可知：在60～70℃時(shí)，其它酶的相對(duì)活性明顯比蛋白酶的相對(duì)活性低，所以保溫一定時(shí)間的作用是大幅度降低發(fā)酵液中其他酶的活性，故選D。

（4）枯草芽孢桿菌蛋白酶制備的合理工藝步驟應(yīng)為①過濾→④濃縮→②干燥。