Question

【題目】將某病毒的外殼蛋白（L1）基因與綠色熒光蛋白（GFP）基因連接，構建L-GFP融合基因，再將融合基因與質粒連接構建下圖所示表達載體。圖中限制酶E1~E4處理產生的黏性末端均不相同。下列敘述不正確的是（ ）

A.構建L1-GFP融合基因需要用到E1、E2、E4三種酶

B.E1、E4雙酶切確保L1-GFP融合基因與載體的正確連接

C.GFP可用于檢測受體細胞中目的基因是否表達

D.將表達載體轉入乳腺細胞培育乳汁中含L1蛋白的轉基因羊

Answer 1

【答案】D

【解析】

基因表達載體的構建是基因工程的核心內容，一個表達載體的組成，除了目的基因外，還有啟動子、終止子和標記基因等。根據題意，將某種病毒的外殼蛋白（L1）基因與綠色熒光蛋白（GFP）基因連接，構建L-GFP融合基因，其中綠色熒光蛋白（GFP）基因屬于標記基因，用于篩選和鑒定。

A. 構建L1-GFP融合基因需要先用內切酶處理獲得L1基因和GFP基因，并將二者連接，故需要用到E1、E2、E4三種酶，A正確；

B. 圖中限制酶E1~E4處理產生的黏性末端均不相同，E1、E4雙酶切可以有效減少載體自身連接和融合基因自身連接，保證L1-GFP融合基因與載體準確連接，B正確；

C. 綠色熒光蛋白（GFP）在紫外光或藍光激發下會發出綠色熒光，這一特性可用于檢測細胞中目的基因的表達，C正確；

D. 為了獲得L1蛋白，可將表達載體轉入受精卵中而不是乳腺細胞，用于培育乳汁中含有L1蛋白的轉基因羊，D錯誤。

故選D。