Question

【題目】科研人員在雜交瘤細胞的基礎上，獲得了雙雜交瘤細胞，能夠產生雙特異性抗體，該抗體可以同時結合兩種抗原。

（1）科研人員將抗原α、β分別注射到小鼠體內，引起機體的__________免疫，__________分泌相應抗體。

（2）科研人員獲得上述小鼠的脾臟細胞，制備兩種雜交瘤細胞。每種雜交瘤細胞產生的抗體結構、與抗原結合的情況如圖1所示。

①制備雜交瘤細胞時，需將上述小鼠的脾臟組織，用__________處理獲得單細胞后，再與小鼠的骨髓瘤細胞融合，篩選得到兩種雜交瘤細胞。將兩種雜交瘤細胞用__________試劑處理促進其融合，在培養基中加入__________（天然成分）培養。如果兩種細胞成功融合，則會同時表達出抗體的重鏈A、B和輕鏈a、b，這種細胞稱作雙雜交瘤細胞。

②抗體由兩條重鏈和兩條輕鏈組成，重鏈和輕鏈均分為恒定區和可變區，兩條重鏈依賴于A1或B1進行組裝（A1與B1相同），重鏈與輕鏈的組裝依賴于恒定區A2、a或B2、b（a與b相同）。因此，雙雜交瘤細胞產生的抗體種類較多，其中有一種抗體能同時與抗原α、β結合稱為雙特異性抗體，如圖2。請將A1、A2、B1、B2、a、b、α、β等字符填入下面的表格中__________。

1	2	3	4	5	6
A2				α

③為使雙雜交瘤細胞只產生圖2所示雙特異性抗體，降低純化分離成本，科研人員對重鏈、輕鏈的結構進行改造。改造思路是在A、B、a、b的恒定區通過改變__________，進而改變蛋白質的空間結構，實現“榫卯”式互補組裝的唯一性，這種改造屬于現代生物技術中的__________工程。

（3）結合雙特異性抗體特點，請分析其在腫瘤治療方面的應用前景：________。

Answer 1

【答案】體液 漿細胞 ①胰蛋白酶 PEG（或“聚乙二醇”） 動物血清

1	2	3	4	5	6
A2	B2	a	b	α	β

③氨基酸種類（或“序列”） 蛋白質 研制與腫瘤細胞和抗腫瘤藥物結合的雙特異性抗體，特異性殺死腫瘤細胞

【解析】

1、單克隆抗體的制備過程：首先用特定抗原注射小鼠體內，使其發生免疫，小鼠體內產生具有免疫能力的B淋巴細胞，利用動物細胞融合技術將B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合，在經過兩次篩選：①篩選得到雜交瘤細胞（去掉未雜交的細胞以及自身融合的細胞）②篩選出能夠產生特異性抗體的細胞群．兩次抗體檢測：專一抗體檢驗陽性，獲得能產生特異性抗體、又能大量增殖雜交瘤細胞，最后從培養液或小鼠腹水中提取單克隆抗體。

2、蛋白質工程指以蛋白質的結構規律及其與生物功能的關系作為基礎，通過基因修飾或基因合成，對現有蛋白質進行基因改造，或制造一種新的蛋白質，以滿足人類的生產和生活的需要。

（1）抗原進入小鼠體內能夠引起機體的體液免疫，使漿細胞分泌抗體。

（2）①制備雜交瘤細胞，將小鼠的脾臟組織用胰蛋白酶處理獲得單細胞。動物細胞的融合需要使用PEG進行誘導，在加入動物血清進行培養。

②雙抗體是同時含有與抗原α、β結合的抗體由于1是A2，根據圖1的結構3為a，2是B2,4是b，5是α，6是β。

即答案為：

1	2	3	4	5	6
A2	B2	a	b	α	β

③蛋白質的空間結構是由氨基酸的種類和排列順序決定，所以可以通過改變氨基酸的種類和排列順序改變蛋白質的空間結構，屬于蛋白質工程。

（3）雙抗體可以和兩種抗原結合，所以可以研制與腫瘤細胞和抗腫瘤藥物結合的雙特異性抗體，特異性殺死腫瘤細胞。