Question

【題目】（生物技術實踐）下表是一種培養基的配方，請回答：

牛肉膏	蛋白胨	NaCl	瓊脂	水
0.5g	1g	0.5g	2g	200ml

(1)培養基從物理性質來說，屬于______培養基。

(2)無菌操作是微生物培養最基本的要求，其中滅菌指的是 ________ 。對于培養基、培養皿、接種環、實驗操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌和消毒方法依次是 ________。（填代號）

①化學消毒 ②灼燒滅菌 ③干熱滅菌 ④紫外線滅菌 ⑤高壓蒸汽滅菌 ⑥巴氏消毒法

⑶在平板劃線法中,每次在灼燒接種環后，為什么要等其冷卻后再進行劃線？

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(4)稀釋涂布平板法統計菌落數目時，一般選擇菌落數在________的平板進行計數，在某一稀釋度下平板上的平均菌落數為50個，所用稀釋液的體積為0.2ml，稀釋倍數為105時，則每毫升樣品中的菌落數為 ________。

(5)以尿素為唯一氮源的培養基中加入________指示劑，培養某種細菌后，如果pH升高，指示劑將________，利用這一特點，可準確地鑒定該種細菌能夠分解尿素。

Answer 1

【答案】固體 使用強烈的理化因素殺死體內外所有的微生物，包括芽孢和孢子 ⑤③②①④⑥ 以免接種環溫度太高，殺死菌種 30-300 2.5107 酚紅 變紅

【解析】

1、使用強烈的理化因素殺死物體內外一切微生物的細胞、芽孢和孢子的過程稱為滅菌；常用的方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌。

2、消毒是指用較為溫和的物理或化學方法僅殺死物體體表或內部的一部分微生物的過程；常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外線或化學藥物消毒法等。

3、培養基按其物理狀態可分為固體培養基、液體培養基和半固體培養基三類。

4、常用的固體培養基上的接種方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法，稀釋涂布平板法可以用來進行微生物的計數．酚紅指示劑可以鑒定尿素分解菌。

（1）固體培養基與液體培養基的區別就是固體培養基中含有凝固劑瓊脂，表中的培養基配方中含有瓊脂，所以是固體培養基。

（2）滅菌是指使用強烈的理化因素殺死物體內外一切微生物的細胞、芽孢和孢子的過程．高壓蒸汽滅菌適用于對一般培養基和玻璃器皿的滅菌．干熱滅菌適用于需要保持干燥的空玻璃器皿的滅菌，凡帶有橡膠的物品和培養基，都不能進行干熱滅菌．無菌室緩沖間和接種箱常用紫外線燈作空氣滅菌．微生物接種時的金屬接種工具和試管口可以用灼燒滅菌．煮沸滅菌通常不能徹底殺滅一些微生物的孢子和芽孢，一般適用于餐具或不耐高溫的食品等的消毒，巴氏消毒法適合對牛奶消毒．所以題中所給的項目所采用的滅菌和消毒方法依次是⑤③②①④⑥。

（3）將燒過的接種環伸入菌種管內，先將環接觸一下沒有長菌的培養基部分，使其冷卻，以免燙死菌體。

（4）稀釋涂布平板法可以用來進行微生物的計數，一般選擇菌落數在30～300的平板進行計數．每毫升樣品中的菌落數為50÷0.2×105=2.5×107。

（5）尿素分解菌產生的脲酶可以將尿素分解為氨使pH升高，從而使酚紅指示劑呈紅色，利用這一特點，可準確地鑒定該種細菌能夠分解尿素。