Question

【題目】某紡織廠為使牛仔布呈現“穿舊”效果，準備用纖維素分解菌處理代替傳統的浮石擦洗。工作人員擬從土壤樣品中分離該類微生物，并進行擴大培養，相關工藝流程如圖。請回答下列問題：

（1）進行土樣中細菌數量的測定，常用稀釋涂布平板法（選用104～106倍的稀釋液）統計樣品中活菌的數量。但第一次用稀釋涂布平板法測定土樣中纖維素分解菌的數量時，所進行實驗的一般基本思路是______。

（2）在系列稀釋操作前，“選擇培養”的一般目的是______。

（3）“涂布接種”時，轉動培養皿的目的是______。

（4）在鑒別培養基上，菌落周圍的透明圈大小可能與纖維素酶的______有關。在分離出所需的菌株之后，還應通過______的實驗來進一步確定分離出的菌株是纖維素分解菌，而后開展擴大培養。

（5）纖維素酶的測定方法一般是______。

Answer 1

【答案】將稀釋范圍適當放寬的稀釋液，采用稀釋涂布平板法分別接種的鑒別培養基（用CR染色），以保證從中選擇出菌落數在30-300的平板進行計數 以確保能夠從樣品中分離得到所需要的微生物，增加纖維素分解菌的數量 使菌液分布均勻 量和活性 發酵產纖維素酶 對纖維素酶分解濾紙等纖維素后產生的葡萄糖進行定量測定

【解析】

據圖分析可知，采用稀釋涂布分離法對纖維素分解菌進行分離和培養；纖維素分解菌的鑒別可以使用剛果紅染液，在纖維素分解菌的菌落周圍會出現透明圈，而培養基的其他地方呈紅色。

（1）第一次用稀釋涂布平板法測定土樣中纖維素分解菌的數量時，需要將稀釋范圍適當放寬的稀釋液，采用稀釋涂布平板法分別接種的鑒別培養基（用CR染色），以保證從中選擇出菌落數在30-300的平板進行計數。

（2）選擇培養的目的是確保能夠從樣品中分離得到所需要的纖維素分解菌，增加纖維素分解菌的數量。

（3）“涂布接種”時，轉動培養皿的目的是使菌液分布均勻。

（4）該實驗中的透明圈的大小與纖維素酶的量和活性有關。在分離出所需的菌株之后，還應通過發酵產纖維素酶實驗來進一步確定分離出的菌株是纖維素分解菌，而后開展擴大培養。

（5）纖維素酶的測定方法一般是對纖維素酶分解濾紙等纖維素后產生的葡萄糖進行定量測定。