Question

【題目】葉綠體是綠色植物光合作用的場所，高完整度的葉綠體的分離是進行光合作用及其調控機理研究的重要保證。 下面是某研究小組進行葉綠體分離的實驗流程（如圖1）。請回答下列問題：

（1）以上采取的分離葉綠體的方法稱為________法。研磨時注意不要用力過猛和研磨過細，其目的是______。

（2）將組織勻漿在100r/min的條件下離心2min，以去除其中的組織殘渣和一些______。葉綠體的分離應在0.35mV/L NaCl溶液（等滲溶液）中進行，以免因______的改變使葉綠體受到損傷。

（3）取一滴葉綠體懸液滴于載玻片中央，蓋上蓋玻片，用高倍顯微鏡觀察。下列關于對菠菜葉離體葉綠體觀察結果的描述，正確的有______。

A.呈橢球形 B.呈螺旋式帶狀 C.具有雙層膜 D.內部含有較深的綠色小顆粒

（4）將分離得到的新鮮葉綠體置于白光下照射一段時間后，突然改用光照強度與白光相同的綠光照射，短時間內，葉綠體中C3化合物的相對含量______（填“增多”或“減少”或“不變”）。

（5）小麥葉片富含纖維素，用上述方法無法成功分離葉綠體，小麥葉綠體的分離可以先利用______酶處理小麥幼苗葉，獲得原生質體，再從原生質體中分離出高活性的葉綠體。

Answer 1

【答案】差速離心法 防止葉綠體被破壞 未被破碎的完整細胞 滲透壓 AD 增多 纖維素酶和果膠酶

【解析】

差速離心法常用于獲取細胞中的某一物質，其原理是在一定轉速條件下，不同密度大小的物質沉降速度不一樣，最終使有密度差異的物質得以分離。

據圖分析，圖示為葉綠體的分離過程，實驗過程包括研磨、過濾、低速離心、高速離心、制備懸浮液、觀察與檢測，可見分離葉綠體采用的是差速離心法。

（1）根據以上分析已知，圖示分離葉綠體的方法為差速離心法；研磨時注意不要用力過猛，也不必研磨過細，以防破壞葉綠體的結構。

（2）將組織勻漿在100r/min的條件下離心2min，以去除其中的組織殘渣和一些未被破碎的完整細胞；葉綠體的分離應在0.35mV/L NaCl溶液（等滲溶液）中進行，以免滲透壓的改變使葉綠體受到損傷。

（3）普通光鏡下，可看到葉綠體為綠色橢球形；在高倍鏡下可看到葉綠體內部含有較深的綠色小顆粒，即基粒；而葉綠體具有雙層膜需要在電子顯微鏡下才能觀察到，故選AD。

（4）根據題意分析，突然改用光照強度與白光相同的綠光照射，則光反應減弱，產生的ATP和[H]減少，導致三碳化合物的還原減弱，而三碳化合物的生成速率基本不變，因此短時間內三碳化合物的含量增加。

（5）小麥細胞壁的主要成分是纖維素和果膠，因此用纖維素酶和果膠酶處理可獲得原生質體。