Question

【題目】為了調查自來水的質量情況，某研究小組對自來水水樣中的細菌含量進行了測定，請回答下列問題：

（1）用錐形瓶取水樣前，可采用____法對錐形瓶滅菌。制備固體培養基的步驟是：計算、稱量、溶化、滅菌、___ 。

（2）自來水水樣需用____進行梯度稀釋后再涂布平板，培養結果如圖所示，推測該同學可能的操作失誤是____。能據菌落數推測樣品中的活菌數的原因是____。

（3）測定自來水中細菌的含量除采用上述方法外，還可以用____法對菌落數進行測定。為鑒別水樣中大腸桿菌，培養基中還應加入的物質是____。

（4）經基因工程改造后的大腸桿菌可以生產出耐受性較好的堿性蛋白酶，目前可以采用固定化酶技術多次重復使用酶以降低成本。一般來說，酶更適合采用____法固定化。

Answer 1

【答案】高壓蒸汽滅菌或干熱滅菌 倒平板 無菌水 涂布平板時涂布不均勻 當樣品的稀釋度足夠高時，一個菌落來源于樣品稀釋液中的一個活菌 濾膜 伊紅美藍 化學結合法和物理吸附法

【解析】

1、制備牛肉膏蛋白胨培養基的步驟是計算→稱量→熔化→滅菌→倒平板。

2、稀釋涂布法是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養基的表面，在適宜條件下培養。在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞，從而能在培養基表面形成單個的菌落。

（1）在微生物的培養過程中，對錐形瓶滅菌可用高壓蒸汽滅菌或干熱滅菌。制備固體培養基的步驟是：計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。

（2）為防止雜菌污染，自來水水樣需用無菌水進行梯度稀釋后再涂布平板。圖中菌落分布不均勻，由此推測該同學接種時可能的操作失誤是涂布不均勻。當樣品的稀釋度足夠高時，聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞，經過培養，單個細胞可形成單個菌落，即一個菌落來源于樣品稀釋液中的一個活菌，所以可根據平板上的菌落數推測樣品中的活菌數。

（3）測定自來水中細菌的含量還可以用濾膜法對菌落數進行測定。為鑒別水樣中大腸桿菌，培養基中還應加入的物質是伊紅美藍，在該培養基上，大腸桿菌的菌落呈現黑色，可以根據培養基上黑色菌落的數目，計算出大腸桿菌的數量。

（4）由于酶分子較小，易從包埋材料中漏出，所以酶的固定化常用化學結合法和物理吸附法，而不用包埋法。