Question

【題目】（三）生物技術及生命科學的應用。

下表是幾種限制酶識別序列及其切割位點，圖1、圖2中標注了相關限制酶的酶切位點。

1. 若圖2中目的基因D是人的α-抗胰蛋白酶的基因，現在要培養乳汁中含α-抗胰蛋白酶的羊，研究者需將該基因與質粒重組后，通過顯微注射法（方法）注入到羊的中，則發育成的羊（轉基因羊）有可能分泌含α-抗胰蛋白酶的乳汁。該轉基因羊的培育涉及的過程有____（多選）。

A. DNA 自我復制

B. DNA 以其一條鏈為模板合成RNA

C. RNA 自我復制

D. 按照RNA 上密碼子的排列順序合成蛋白質

2. 轉基因技術中通常用圖1 中質粒作為載體，質粒的本質是_____。與轉基因羊相比，克隆多利羊的誕生所運用的生物技術是____，該技術的理論基礎是____。

3. 用圖1中質粒和圖2目的基因構建重組質粒，應選用____兩種限制酶切割，酶切后的載體和目的基因片段，通過____酶作用后獲得重組質粒。

4. 若BamH I酶切的DNA 末端與Bcl I酶切的DNA末端連接，連接部位的6個堿基對序列為______。

5. 蛋白酶具有廣泛的應用前景，所以常產業化生產，如果蛋白酶的產業化需要其活性在固定化處理時不受損失，且在多次重復使用后仍能維持穩定的活性，則應選擇圖3中的____（A/B/C）固定化工藝。

Answer 1

【答案】

【1】 ABD

【2】 小型雙鏈閉環的DNA分子 細胞核移植 細胞核全能性

【3】 BclI和Hind Ⅲ DNA連接

【4】

【5】 C

【解析】

根據題意和圖示分析可知：在質粒上存在BamHI、BclⅠ、BamHI和HindⅢ等四個酶切位點，其中BamHI的切割位點在兩個抗性基因上都有，而抗性基因為載體的標記基因，因此不可用該酶切割；在目的基因上，BclⅠ、BamHI、HindⅢ和Sau3AⅠ四種酶也存在酶切位點，因此為防止任意連接，且在必須具備標記基因的情況下，應該選擇的限制酶是BclI和Hind Ⅲ。

【1】轉基因羊的遺傳物質是DNA，會發生DNA的復制，A正確；目的基因表達產生α-抗胰蛋白酶的乳汁的過程包括轉錄和翻譯，其中轉錄是以DNA的一條鏈為模板合成RNA的過程，B正確；轉基因的遺傳物質是DNA，RNA不能復制，C錯誤；翻譯是按照RNA 上密碼子的排列順序合成蛋白質的過程，D正確。

【2】質粒是細胞質中的小型雙鏈閉環的DNA分子；與轉基因羊相比，克隆多利羊的誕生所運用的生物技術是細胞核移植，該技術的理論基礎是動物細胞核的全能性。

【3】根據以上分析已知，用圖1中質粒和圖2目的基因構建重組質粒，應選用BclI和Hind Ⅲ兩種限制酶切割，并將切割后的質粒與目的基因利用DNA連接酶連接。

【4】根據表格分析，用BamH I酶切的DNA 末端與Bcl I酶切的DNA末端連接，連接部位的6個堿基對序列為。

【5】據圖分析，ABC固定化酶的方法分別對應交聯法、吸附法、包埋法，其中包埋法需要其活性在固定化處理時不受損失，且在多次重復使用后仍能維持穩定的酶活性，故選C。