Question

【題目】回答下列（一）、（二）小題：

（一）回答下列《生物技術實踐》有關問題：

（1）高壓蒸汽滅菌鍋滅菌，開始加熱時要打開排氣閥、關閉安全閥，其目的是為了_________，以避免鍋內達不到預設的溫度或壓力。

（2）葡萄酒呈現深紅色的原因是_________。發酵完成后，將發酵液用_________過濾，除去葡萄皮和籽；釀果酒時，加蔗糖是為了_________。

（3）在制作泡菜測定亞硝酸鹽含量時，顯色劑是由10g/L的對氨基苯磺酸和1g/L的N-1-萘基乙二胺_________混合而成，泡菜打成勻漿前，_________（填不需要/需要）用清水沖洗；泡菜腌制過程中若泡菜壇有砂眼，常導致腌制的蔬菜臭而不酸，其原因可能是_________條件下乳酸菌不發酵，而其它雜菌繁殖后導致蔬菜腐敗發臭。泡菜制作過程中影響亞硝酸鹽含量的因素有_________等（寫出兩點）。

（二）藥用植物是一類具有特殊用途的經濟植物，對人類健康具有重要的醫療和保健作用。藥用植物的品種改良工作引起了科研人員的重視。請回答下列問題：

（1）科研人員通過對植物_________的培養進行單倍體克隆。為鑒定單倍體植株，可通過制作臨時裝片觀察_________來確定。

（2）人參皂甙具有抗腫瘤等作用，科研人員設計如圖1所示流程制備人參皂甙Rg3，并研究過程③生物反應器中人參細胞產量、人參皂甙Rg3產量隨培養時間的變化，結果如圖2。

圖1中的過程②常將愈傷組織進行懸浮培養得到X，X是_________，實現了能產生人參皂甙Rg3的細胞克隆及其工業化生產。由圖2可知，影響人參皂甙Rg3產量的因素是_________。

（3）東莨菪堿是從東莨菪中分離出來的可用于麻醉鎮痛、止咳、平喘。將莨菪中提取到天仙子胺6β羧化酶基因轉入顛茄中，轉基因顛茄能夠產生大量的東莨菪堿。構建該目的基因的基因文庫需要用到的工具酶是_____，然后用_________從該基因文庫中選擇、釣取。含目的基因的農桿菌侵染植物細胞時，加入農桿菌培養液中的植物組織往往切成許多小塊，這種創傷刺激的意義是_________（寫出兩點）。

Answer 1

【答案】排走冷空氣 發酵過程中葡萄皮的色素進入到發酵液中 兩層紗布 增加酒精含量與糖含量 等體積 不需要 有氧 溫度、食鹽用量和腌制時間等 花藥（或花粉） 有絲分裂中期的染色體數目 細胞系（或細胞株） 培養時間、人參細胞產量（或細胞數量、密度） 限制性核酸內切酶和DNA連接酶 基因探針（或核酸探針、單抗特異探針） 釋放信號分子、吸引農桿菌；促進脫分化有利于形成愈傷組織

【解析】

（1）在葡萄酒自然發酵的過程中,起主要作用的是附著在葡萄皮表面的野生型酵母菌；葡萄酒呈現深紅色的原因：在發酵過程中,隨著酒精濃度的提高,紅葡萄皮的色素也進入發酵液，在缺氧，呈酸性的發酵液中，酵母菌可以生長繁殖，而絕大多數其他微生物都因無法適應這一環境而受到制約。（2）測定亞硝酸鹽含量的方法是：比色法，原理是在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對基苯磺酸發生重氮化反應后，與 N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結合形成玫瑰紅色染料，與已知濃度的標準顯色液目測比較，估算泡菜中亞硝酸鹽含量。腌制的條件：在腌制過程中要注意控制腌制的時間、溫度和食鹽的用量。溫度過高、食鹽用量不足10%、腌制時間過短，容易造成細菌大量繁殖，亞硝酸鹽含量增加。一般在腌制10天后，亞硝酸鹽的含量開始下降。

（一）（1）高壓蒸汽滅菌鍋滅菌，開始加熱時要打開排氣閥、關閉安全閥，其目的是為了使水沸騰，排出鍋內的冷空氣，以避免鍋內達不到預設的溫度或壓力。

（2）在發酵過程中，隨著酒精度數的提高，紅葡萄皮的色素也進入發酵液，使葡萄酒呈現深紅色；發酵完成后，將發酵液用兩層紗布過濾，除去葡萄皮和籽；釀果酒時，加蔗糖是為了增加酒精含量和糖含量。

（3）顯色劑是由10g/L的對氨基苯磺酸和1g/L的N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽等體積混合而成，泡菜打成勻漿前，不需要用清水沖洗，若沖洗會將乳酸菌菌種沖洗掉；乳酸菌是厭氧菌，若泡菜腌制過程中泡菜壇有砂眼，導致氧氣含量增加，有氧條件下乳酸菌不發酵，而其他雜菌繁殖后導致蔬菜腐敗發臭。泡菜制作過程中要注意控制腌制的時間、溫度和食鹽的用量。如果溫度過高、食鹽用量過低、腌制時間過短，亞硝酸鹽含量會增加。

（二）（1）科研人員通過對植物花粉的培養進行單倍體克隆；染色體在光學顯微鏡下清晰可見，所以為鑒定單倍體植株，可通過制作臨時裝片觀察有絲分裂中期的染色體數目來確定。

（2）圖1中的過程②常將愈傷組織進行懸浮培養得到X，X是細胞株，實現了能產生人參皂甙Rg3的細胞克隆及其工業化生產。由圖2可知，隨著培養時間的延長，人參細胞的數量先增加后穩定；人參皂甙Rg3產量先增加后穩定，故影響人參皂甙產量的因素有人參細胞的數量和培養時間。

（3）構建該目的基因的基因文庫需要用到的工具酶是限制酶和DNA連接酶，然后用基因探針從該基因文庫中選擇、釣取。含目的基因的農桿菌侵染植物細胞時，加入農桿菌培養液中的植物組織往往切成許多小塊，這種創傷刺激可以釋放信號分子、吸引農桿菌；促進脫分化有利于形成愈傷組織。