Question

（10分）研究表明，HER2/neu是一種原癌基因，它表達的H蛋白在多種惡性腫瘤特別是乳腺癌細胞中過量表達。抗H蛋白單克隆抗體能抑制過量表達H蛋白的乳腺癌細胞的生長，目前已成為有效的生物治療手段。

（1）選擇H蛋白作為單克隆抗體的作用靶點，是因為H蛋白在成年個體的正常組織中___________（填“低表達”或“高表達”）。H蛋白是一個跨膜蛋白，結構如圖12所示。制備免疫小鼠用的H蛋白（抗原）時，應構建___________區基因，轉入原核細胞表達并提純。

（2）將H蛋白注射到小鼠體內，取該小鼠的脾臟細胞與___________細胞進行融合，使用的化學誘導劑是______________，細胞融合的原理是_________________。

（3）將融合細胞在__________培養基中培養，一段時間后培養基中只有雜交瘤細胞生長。將雜交瘤細胞轉到多孔培養板上培養，應用____________技術進行抗體陽性檢測。經多次篩選，就能得到產生單克隆抗體的雜交瘤細胞。

（4）將篩選得到的雜交瘤細胞，經過_______________或小鼠腹腔內培養，獲取大量的單克隆抗體。

（5）治療乳腺癌時，可單獨使用抗H蛋白單克隆抗體，也可將該單克隆抗體與抗癌藥物結合構建“生物導彈”，殺死癌細胞。這充分體現了單克隆抗體______________的特點。

 

Answer 1

【答案】

 

（1）低表達    胞外

（2）骨髓瘤     PEG（或“聚乙二醇”）    細胞膜的流動性

（3）選擇        抗原-抗體雜交

（4）體外（培養）

（5）特異性強（或“識別抗原部位專一”）

【解析】

試題分析：⑴根據題意可知，原癌基因的表達產物H蛋白在正常組織中 低表達；根據H蛋白的結構圖可知，若用H蛋白制備抗原需要利用胞外區基因 ⑵在制備單克隆抗體過程中，需要將脾臟細胞與骨髓瘤細胞融合，誘導其融合的試劑為聚乙二醇，其融合的原理是借助于細胞膜的流動性 ⑶將融合細胞接種在選擇培養基中，從中選出雜交瘤細胞，利用抗原—抗體雜交技術最后選出產生單克隆抗體的雜交瘤細胞 ⑷將雜交瘤細胞經過體外培養或小鼠腹腔內培養，獲得大量的單克隆抗體  ⑸單克隆抗體的優點是特異性強，靈敏度高

考點：本題主要考查單克隆抗體，意在考查考生能理解所學知識的要點，把握知識間的內在聯系，形成知識的網絡結構的能力。