Question

【題目】類風濕性關節炎（RA）是一種自身免疫病，致殘性強。研究表明，該病的病理改變與腫瘤壞死因子-α（TNF-α）密切相關，而一種人鼠嵌合的抗TNF-α單克隆抗體能有效治療RA。下圖為該單克隆抗體制備過程示意圖。

（1）圖中的抗原A是______________，常用的促融劑是_______________。細胞融合完成后，融合體系中除含有未融合的細胞和雜交瘤細胞外，可能還有骨髓瘤細胞自身融合細胞、淋巴細胞自身融合細胞。體系中出現多種類型細胞的原因是________________。

（2）HAT培養基的作用是經選擇性培養篩選出雜交瘤細胞，之后還需要進行__________培養和抗體檢測，經多次篩選，就可獲得能分泌單一抗體的雜交瘤細胞。最后獲得的雜交瘤細胞只能產生一種單一抗體的原因是___________________。

（3）單克隆抗體的特點是__________________。單克隆抗體的制備涉及細胞工程中的動物細胞融合技術和____________技術。

（4）單克隆抗體主要的用途有：_______________________________（至少答兩點）。

Answer 1

【答案】腫瘤壞死因子-α（或TNF-α） 聚乙二醇（PEG） 細胞融合是隨機的，且融合率達不到100% 克隆化培養 每一個B淋巴細胞只分泌一種特異性抗體 特異性強、靈敏度高、可大量制備 動物細胞培養 作為診斷試劑、用于治療疾病、用于運載藥物

【解析】

單克隆抗體是由單一B細胞克隆產生的高度均一、僅針對某一特定抗原的抗體。通常采用雜交瘤技術來制備，雜交瘤抗體技術是在細胞融合技術的基礎上，將具有分泌特異性抗體能力的效應B細胞和具有無限繁殖能力的骨髓瘤細胞融合為雜交瘤細胞，雜交瘤細胞既能產生抗體，又能無限增殖。用具備這種特性的單個雜交瘤細胞培養成細胞群，可制備針對一種抗原的特異性抗體即單克隆抗體。

題圖分析，單抗制備過程為：將特定的抗原注射小鼠→篩選出產生抗體的B淋巴細胞→誘導細胞融合→用HAT培養基篩選出雜交瘤細胞→篩選出能夠產生特異性抗體的雜交瘤細胞→大規模培養獲得單克隆抗體。單克隆抗體典型優點是特異性強、靈敏度高、可大量制備。
動物細胞培養技術是動物細胞工程的基礎，是單克隆抗體技術的基礎。單克隆抗體最廣泛的用途是作為診斷試劑，也可用于治療疾病、用于運載藥物，主要是用于癌癥治療、也有少量是是用于其他治療的。

（1）要制備抗TNF-a單克隆抗體需要給小鼠注射腫瘤壞死因子a(TNF-a)，即圖中的抗原A。常用物理或化學方法促融，最常用的化學促融劑是聚乙二醇(PEG)，細胞融合完成后，由于細胞融合是隨機的，且融合率達不到100%，所以細胞融合完成后，融合體系中除含有未融合的細胞和雜交瘤細胞外，可能還有骨髓瘤細胞自身融合細胞、淋巴細胞自身融合細胞。
（2）HAT培養基的作用是選擇性培養篩選出雜交瘤細胞，在抗體檢測之前需要進行克隆化培養，以增加雜交瘤細胞數量。經多次篩選，就可獲得能分泌單一抗體的雜交瘤細胞。雜交瘤細胞只能產生一種單一抗體的原因是每一個B淋巴細胞只分泌一種特異性抗體。

（3）單克隆抗體典型優點是特異性強、靈敏度高、可大量制備。動物細胞培養技術是動物細胞工程的基礎，單克隆抗體技術是動物細胞工程的應用之一。故單克隆抗體的制備涉及細胞工程中的動物細胞融合技術和動物細胞培養技術。

（4）單克隆抗體最廣泛的用途是作為診斷試劑，也可用于治療疾病、用于運載藥物，主要是用于癌癥治療、也有少量是是用于其他治療的。